еблагополуччя і в екологічному плані.
Тому, перед нами були поставлені завдання вишукування більш оптимального варіанту приготування високочутливого алергену з використанням авірулентние шт. B. abortus 19.
Це рішення було прийнято з причини того, що він є найбільш безпечним штамом, який характеризується наступними ознаками:
Походження штам B. abortus 19. Даний штам отриманий 1923 р. в США з молока корови. Ідентифікований по визначник бактерій Берджі, М. (1997, т. 1, С. 81-82). Зрівняний з типовим штамом колекційний № В - 0027 В. Abortus 54 (еталонний). Штам отриманий шляхом відбору колоній в S - формі. Штам при серологічної типізаціїз S-бруцельозній і моноспеціфіческой антіабортусной сироватками дає позитивні реакції, а з моноспеціфіческой антімелітензісной і R - бруцельозній сироватками негативну реакцію.
Біотехнологічні характеристики: штам типовий, слабовірулентнимі, використовується для приготування вакцинних і діагностичних препаратів. Добре росте в агарі Д, Еритреї агарі, МПА, МППГГА, не росте на середовищах з додаванням пеніциліну в дозі 2,5-5 тис. од / мл середовища.
Росте на середовищі з додаванням фуксину (1:50000) і не росте на середовищі з тіоніном (1:25000 і 1:50000). Проба з тріпафлавіном (1:500) і реакція термоагглютінаціі негативні.
Морфолого - культуральні властивості: добре росте на Еритреї - агарі, Т ° +37-38 ° С, 48 годину в термостаті; овоида, довжина 0,4-2,5 мкм, ширина 0,4-0,6 мкм; обриси решт округлі, грамнегативні, кіслотонеустойчів, нерухомі, тип клітинної стінки липополисахарид, спеціалізовані клітини не утворює, колоній щільні, гладкі, поверхня блискуча, S - форма.
Фізіолого - біохімічні властивості: хемоорганотрофи, аероб, тип катаболізму - дихання, внутрішньоклітинний паразит, чутливий до пеніциліну 2,5-5 ОД / мл середовища, зростання стимулюється додаванням крові та сироватки; джерело вуглецю - глюкоза, гліцерин, джерело сірки - цистин, володіє уреазной, оксидазної, каталазної активністю, утворює Н 2 S, желатин НЕ розріджує, індол не утворює, що не лизирует еритроцити, не утворює ацетілметілкарбінол, виявляються імунохімічними методами - РА, РСК, ІФА , ПЛР, слабопатогеннимі для тварин.
Культуру B. abortus 19, що містить у своєму складі S-форми бруцел вирощували на твердому живильному середовищі на протязі 3 діб з подальшим їх змивом 0,5%-ний фізіологічним розчином, отриману бактеріальну масу фільтрували через потрійний марлевий фільтр, потім суспензію бруцелл стерильною дистильованою водою доводили до концентрації 100 млрд мікробних клітин в 1,0 см? . Далі отриману суспензію автоклавуватися при 1 атм. в протягом 30 хв. і залишали при кімнатній температурі на 2-3 сут., потім фільтрували через стерильні фільтри, отриманий фільтрат розводили в 10 разів 0,85%-ний фізіологічним розчином, як консервант використовували формалін 37 - 38%, який додавали в кількості 0,2 см? в 100 см? фільтрату і використовували його в якості цільового продукту.
Визначення стерильності алергену проводили шляхом висіву на Еритреї - агарі і м'ясо - пептонном бульйоні. В результаті проведених досліджень висіву залишалися в перебігу 10 днів (період спостереження) стерильними, що свідчать про відсутність бактеріальної забрудненості алергену.
При випробуванні нешкі...
