align="justify"> в природних умовах в точці ініціації реплікації (RIP). Хоча деталі реплікації, яка повинна бути створена в розгорнутій області, повністю не зрозумілі у архей, очікується, що вона мінімально включає MCM, GINs, ПРАЙМАЗИ, PCNA, ДНК-полімерази, і RPA, як описано нижче. Наступні дослідження P. furiosus показали, що АТФази Cdc6/Orc1 білка були повністю пригнічені?? Шляхом зв'язування з ДНК, що містить ORB.
Експерименти на обмежений протеоліз і ДНКаза-I-відбиток припустили, що Cdc6/Orc1 білок змінює свою конформацію на послідовність ORB в присутності АТФ. Фізіологічний сенс цього конформационного зміни не встановлений, але воно має виконувати важливі функції, щоб почати процес ініціації, як і у випадку бактеріального білка DnaA. Крім того, результати аналізу в пробірці показали, що MCM (MCM білковий комплекс) в геліказу-репликативной ДНК, отриманої в ORIC області, є Cdc6/Orc1-завісімим, але не АТФ-залежним. Однак, цього сигналу недостатньо для активації функції розкручування MCM, і деякі інші функції ще належить визначити, щоб функціональне навантаження цієї гелікази сприяла прогресуванню вилки реплікації ДНК.
4. MCM геліказу
Після розмотування області ORIC , репликативная геліказу повинна залишатися завантаженої, щоб забезпечити безперервне розкручування двухцепочечной ДНК у міру просування вилки реплікації в двох напрямках. Комплекс білка MCM, що складається з шести субодиниць (Mcm2, 3, 4, 5, 6, 7 ), як відомо - «ядро» репликативной гелікази в еукаріотичних клітинах. далі взаємодіє з Cdc45 і GINS з утворенням потрійний збірки, яка називається «CMG комплекс», який, як вважають, є функціональною геліказу в еукаріотичних клітинах (рис. 3). Однак ця ідея досі не застосовна для еукаріотичних реплікативних геліказу.
Малюнок 3. ДНК-Амортизація комплексу у еукаріот і архей
Комплекс CMG є репликативной геліказу для шаблону реакції розкручування ДНК у еукаріот. Геноми архей містять гомологи MCM, GINS і білки, але гомологи Cdc45 були ідентифіковані. Останні дослідження показують, що RecJ-Фільнія екзонуклеазная GAN, яка має слабку гомологічну послідовність, що і Cdc45, може працювати в якості геліказного комплексу з MCM і GINS.
Більшість архейних геномів, мабуть, кодують щонайменше один Mcm гомолог і геліказу, і активність цих білків з декількох архейних організмів була підтверджена в пробірці . На відміну від еукаріотичних MCM, архейние MCM складаються з гомогексамера або подвійного гомогексамера, які мають різні активності гелікази ДНК самі по собі в пробірці, і, отже, ці MCM самі по собі можуть функціонувати як репликативная геліказу в природних умовах.
В даний час проводиться велика кількість досліджень Структурно-функціональних відносин у архейних MCM з використанням очищених білків і сайт-спрямованого мутагенезу. Початковий звіт використання ChIP методу показав, що білок MCM у P. Abyssi переважно зв'язується з ініціацією в природних умовах
