очки в банках зі спиртами або помістивши їх у термостат при 37 ° С. Спирти в батареї необхідно своєчасно замінювати. Контролювати придатність спирту дозволяє проба з водою. У відлите з банки невелику кількість спирту додають 1 краплю води. Помутніння розчину свідчить про необхідність заміни спирту в батареї.
Абсолютний спирт можна приготувати з 96%. Для цього застосовують сульфат міді, який поміщають в ступку і прожарюють на спиртівці або в термостаті, періодично розтираючи і розмішуючи до консистенції пилу і блідо-блакитного кольору. Потім сульфат міді засипають в банку з 96% спиртом (4 або 6 частин), щільно закривають її кришкою, збовтують і залишають на кілька днів, періодично струшуючи. Сульфат міді адсорбує воду зі спирту і знову набуває синього забарвлення. Перед використанням абсолютного спирту проводять його контроль спиртометром або в пробірку з невеликою кількістю ксилолу (4-5 мл) додають краплю приготованого спирту (розчин мутніє, якщо спирт недостатньо зневоднений). Хорошим адсорбентом води зі спирту є також силікагель після попереднього просушування його в термостаті.
При відсутності 100% спирту в батарею включають ще одну порцію 96% спирту. Однак у цьому випадку завжди є небезпека недостатнього обезводнення і виникнення труднощів при отриманні зрізів.
З метою прискорення зневоднення застосовують ацетон без домішок (ЧДА), попередньо додавши в нього силікагель для видалення залишків води або дистильований ацетон. Зневоднення проводять в 2-3 змінах ацетону від декількох годин до 1 доби в залежності від величини об'єктів. Зневоднення тканин можливо за допомогою 99% ізопропілового спирту, який безпосередньо змішується з парафіном без проміжних розчинників (ксилол, хлороформ та ін.). Таким же властивістю володіє діоксан, однак у зв'язку з високою токсичністю він не знайшов широкого застосування в патогістологічної техніці
Для зневоднення гліцерином шматочки тканини послідовно поміщають в 60%, 80% і 100% гліцерин на 3-4 год, а потім в суміш, що складається з рівних частин 100% гліцерину і ксилолу.
Виражений вплив на швидкість зневоднення надає мікрохвильове випромінювання. Об'єкти в 70% спирті поміщають на 20 с. в мікрохвильову піч (2,5 Гц/500 В), а потім дообезвожівают в абсолютному спирті протягом 30-60 хв.
Секційний і біопсійний матеріал часто зневоднюють в апаратах типу АТ - 5 та ін. з подальшим просяканням толуолом, хлороформом або їх сумішшю з парафіном. При цьому застосовують дві порції 96% спирту і дві - 100%. Загальна тривалість зневоднення 48 ч. Перевага використання апаратів полягає в тому, що в них матеріал постійно перемішується і знаходиться в підвішеному стані. Однак апарат не включається автоматично після раптового перепаду напруги в електричній мережі, що може призвести до пересушування великої кількості матеріалу.
.3 Ущільнення
Ущільнення матеріалу, необхідне для приготування зрізів, проводиться шляхом просочування попередньо зневодненого матеріалу парафіном, целлоидин, органічними смолами. Більш швидке ущільнення досягається застосуванням методу заморожування шматочків, наприклад, в рідкій углекислоте
Заливка: поміщають зразки в суміш ксилол-парафін і потім в рідкий парафін на 1-2 год при 52-56 ° С. Дають парафину, остигаючи, затвердіти; вирізують з нього блок з ув'язненим зразком і закріплюють на дерев'яному кубику. Також використовують заливку в смоли, желатин і заморожування.
Після остаточного просочування об'єкта його заливають розплавленим парафіном, спеціально приготованим для цих цілей і зберігаються в термостаті.
В якості формочок для заливки використовують різноманітні пристосування. Г-образні гладкі косинці виготовляють з металу (латунь, свинець, сталь). Рекомендується застосовувати косинці, довга сторона яких дорівнює 8-10 см, коротка - 3 см, висота - 1,5-2 см.
Косинці кладуть на відполіровану металеву або скляну пластину і, зрушуючи кути, створюють формочку потрібних розмірів.
.4 Висновок зрізів
Гістологічна техніка , комплекс методич. прийомів, використовуваних у гістології та Патол. анатомії при виготовленні препаратів клітин, тканин і органів для їх подальшого микроскопирования.
Приготування постійних гістол. препаратів у вигляді тонких зрізів складається з слід. осн. етапів: фіксації, промивки, зневоднення і заливки шматочків, приготування зрізів, фарбування, зневоднення і висновку. Фіксація - збереження структури і в нек-рій ступеня хіміч. складу клітин і тканин шляхом швидкого впливу на них хіміч. або физич. агентів, що запобігають розвитку посмертних змін. Для фіксації використовують розчи...
