их механізмів поділу (найчастіше адсорбційного). Адсорбційні ефекти зазвичай проявляються на жорстких сорбентах, але іноді спостерігаються і на напівжорстких гелях, мабуть, через підвищений спорідненості до матриці гелю. Прикладом може служити адсорбція ароматичних сполук на стирол-дівінілбензольних гелях.
В
Рис. 2. Калібрувальна крива
Радянські дослідники запропонували теорію єдиного механізму рідинної хроматографії полімерів на жорстких гелях, з якої випливає, що зміною параметрів взаємодії в системі полімер - сорбент - розчинник можна переходити від адсорбційного механізму до ексклюзіонному і навпаки. У загальному випадку в ексклюзіонной хроматографії потрібно прагнути повністю придушити адсорбційні та інші побічні ефекти, так як вони, особливо при дослідженні молекулярно-масового розподілу (ММР) полімерів, можуть істотно спотворити результати аналізу.
Принциповими відмінностями ексклюзіонной хроматографії від інших варіантів є заздалегідь відома тривалість аналізу в конкретній використовуваної системі, можливість передбачення порядку елюювання компонентів за розміром їх молекул, приблизно однакова ширина піків у всьому діапазоні селективного розділення і впевненість у виході всіх компонентів проби за досить короткий проміжок часу, відповідний обсягом Vt. Хоча даний метод застосовують, головним чином, для дослідження ММР полімерів та аналізу макромолекул біологічного походження (білки, нуклеїнові кислоти і т.д.), зазначені особливості роблять його надзвичайно перспективним для аналізу низькомолекулярних домішок у полімерах і попереднього розділення проб невідомого складу. Отримана при цьому інформація суттєво полегшує вибір найкращого варіанту ВЕРХ для аналізу даної проби. Крім того, мікропрепаратівное ексклюзіонное поділ часто використовують в якості першого етапу при поділі складних сумішей шляхом комбінації різних видів ВЕРХ.
Обмежений діапазон коефіцієнтів розподілу визначає і головний недолік ексклюзіонной хроматографії - помітно меншу, ніж в інших варіантах ВЕРХ, число піків, які можуть бути повністю розділені на колонці заданої ефективності. Проте останнім часом завдяки успіхам досягнутим в технології виготовлення високоефективних колонок, цей метод все ширше застосовують і для поділу малих молекул.
Особливості апаратури
Апаратура для ексклюзіонной хроматографії принципово нічим не відрізняється від тієї, яку використовують у інших видах ВЕРХ. Ексклюзіонное поділ можна здійснити на будь-якому рідинному хроматографі, встановивши в нього відповідні колонки. Характеристики апаратури впливають головним чином на точність одержуваних результатів. Специфічними для даного методу є тільки деякі детектори та особливі вимоги до систем обробки даних.
З усіх варіантів ВЕРХ в ексклюзіонной хроматографії полімерів пред'являються найбільш жорсткі вимоги до стабільності потоку рухомої фази. Тому потрібно використовувати насосні системи з точністю...
