p>
.
Очевидно, що при великих значеннях часу експонента прагне до нуля, і концентрація продукту від часу змінюватиметься лінійно. З останнього рівняння випливає, що точка перетину продовження прямолінійної залежності осі часу () визначається виразом:
. (9)
Цей час називається характеристичним часом. p align="justify"> З використанням цього поняття запишемо вираз (7), причому вираз перед дужкою перетворимо таким чином:
. (10)
Якщо час реакції і початкова концентрація субстрату багато більше початкової концентрації ферменту, тобто постійна, то рівняння (10) переходить в рівняння для квазистационарной концентрації фермент-субстратного комплексу, тобто в рівняння виду:
. (11)
Зручно для подальшого аналізу провести наступні дії: помножити обидві частини (11) на . Тоді отримаємо:
. (12)
Величина в рівнянні (12) є початкова швидкість ферментативної реакції в квазістаціонарному стані. Оскільки вона постійна, то інтегрування (12) призводить до (13):
. (13)
Коли реакція виходить на квазістаціонарний режим, концентрація продукту лінійно залежить від часу ().
. (14)
Для знаходження констант швидкостей окремих стадій необхідно провести серію експериментів, в яких предстаціонарная кінетика вивчається в реакціях з різними початковими концентраціями субстрату.
Щоб визначити константи, побудуємо для кожної залежності графік в координатах Ср від ?. У цієї залежності є дві ділянки: нелінійний при малому часі і лінійний, коли реакція вже вийшла на стаціонарний режим. За цим лінійному ділянці можна визначити швидкість процесу:
. (15)
За експериментальними даними побудуємо кінетичні криві і визначимо по ним початкові швидкості реакції в квазістаціонарному режимі і характеристичний час.
Таблиця 1
t 0,010,60,700,860,90,981,041,101,2 cp0, 01129,812,518,022,026,032,5
В
Рис. 1 - Кінетична крива досвіду 1, при якому початкова концентрація субстрату дорівнювала 50 мМ
Як описано в літер...
