злоякісних новоутвореннях шлунка. Знижена кислотність (гіпохлоргідрія) зустрічається при гіпоацидний гастрит, іноді при виразковій хворобі шлунка. Підвищена кислотність (гіперхлоргідрія) має місце при гіперацидному гастриті і часто супроводжується виразковою хворобою шлунка і дванадцятипалої кишки. Присутність молочної кислоти вказує зазвичай на гіпоацидний гастрит або рак шлунка. У зв'язку з цим визначення кислотності шлункового соку та наявність молочної кислоти в ньому має важливе значення для діагностики шлунково-кишкових захворювань. br/>
Робота 36. Визначення кислотності шлункового соку діагностичним набором В«АцідотестВ»
Реактиви. 25% соляна кислота, набір В«АцідотестВ». p align="justify"> Обладнання. Штатив із пробірками (діаметр 11-13 мм), піпетки на 5 мл, мірні колби на 200 мл. p align="justify"> Матеріал. Контрольна і досвідчена сеча. p align="justify"> Метод заснований на звільненні з прийнятого тест-драже барвника, кількість якого залежить від кислотності шлункового соку.
Хід визначення. Після спорожнення сечового міхура обстежуваний приймає 1-2 таблетки кофеїну, який підвищує діурез і посилює шлункову секрецію. Через 1 годину проводиться спорожнення сечового міхура і отримана сеча позначається як В«контрольнаВ». Після цього з невеликою кількістю води, без розжовування, приймається 3 тест-драже. Через 1,5 години повторно слід спорожнення сечового міхура і сеча позначається як В«1,5-годиннаВ». Як контрольна сеча, так і отримана через 1,5 години, розбавляється водою до 200 мл. Розбавлену сечу (контрольна і дослідна) вносять у кількості 5 мл, додають 5 мл 25% розчину соляної кислоти. У пробірці, яка містить 1,5-годинну сечу (дослідна проба) у присутності барвника, з'являється фарбування яскраво-червоного кольору. Інтенсивність фарбування тут же порівнюють з кольоровою шкалою, тому що при стоянні колір змінюється.
Оцінка результатів. Збіг розвинувся фарбування розділенню, позначених буквами В«АВ» на кольоровій шкалі вказує на наявність вільної соляної кислоти і нормальну кислотність шлункового соку, при більш інтенсивної забарвленням - гиперацидность, при фарбуванні, відповідному між поділами В«АВ» і В«ВВ» позначає гіпоацидність.
Оформлення роботи. Зіставити розвинуте фарбування з кольоровою шкалою і зробити висновок про характер кислотності шлункового соку. br/>
Робота 37. Гідроліз білка ферментами травного тракту
Перетравлювання білка відбувається за участю протеолітичних ферментів шлунка (пепсин і гастріксін) і кишечника (трипсин, хімотрипсин, карбоксипептидази А і В, амінопептідазу, еластаза та ін.) Кожен з ферментів специфічно гідролізує пептидні зв'язки, утворені певними амінокислотами в поліпептидного ланцюга перетравного білка (див. підручник, с.178-181). Оптимум рН дії протеїназ шлунка знаходиться в кислому області і дорівнює 1,5-2,0 для пепсину і 3,0-3,5 для гастріксіна, в той час як протеолітична активність ферментів кишечника максимальна при рН 7,6-8,5.
Дослідження активності протеолітичних ферментів проводиться шляхом аналізу швидкості гідролізу доданого білка або визначення кількості утворюються в ході реакції пептидів і вільних амінокислот.
Реактиви. Фібрин *; соляна кислота, 0,05 і 0,1 М розчини; гідроксид натрію, 0,4%-ний розчин; карбонат натрію, 0,4%-ний розчин; лакмусовий папір. p align="justify"> Обладнання. Штатив із пробірками; піпетки місткістю 1 і 2 мл; термостат, відрегульований на 38? С.
Матеріал.
Пепсин, свіжоприготований 0,1%-ний розчин в 0,05 М соляній кислоті.
Трипсин, кристалічний препарат у флаконах, або панкреатин, порошок. Перед вживанням готують 0,1%-ний розчин.
а. Демонстрація гідролізу білка під дією пепсину. Метод заснований на візуальному спостереженні швидкості гідролізу білка пепсином, яка визначається за розчиненню шматочків фібрину. p align="justify"> Хід визначення. Беруть п'ять пробірок і вносять в першу 1 мл розчину пепсину, в другу - попередньо прокип'яченої розчину пепсину, в третю - розчину соляної кислоти (0,05 М), у четверту і п'яту попередньо нейтралізованого гідроксидом натрію розчину пепсину. p align="justify"> У всі пробірки, крім п'ятої, поміщають однакові невеликі шматочки фібрину і ставлять проби на 20-30 хв у термостат при 38 Вє С, після чого зазначають зміни, що відбулися з волокнами фібрину в перших чотирьох пробірках.
П'яту пробірку охолоджують і нейтралізують її вміст розчином соляної кислоти за лакмусовим папірцем. Потім доливають в пробірку 1 мл 0,1 М розчину соляної кислоти і додають невеликий шматочок фібрину. Пробу знову вміщують у термостат при 38 В° С та через 20-30 хв відзначають зміни в...
