аглютинації - РНГА). Для отримання достовірних результатів про наростання титрів антитіл в реакції РНГА важливо досліджувати парні сироватки, тобто сироватки крові, взяті в перші дні хвороби при надходженні хворого в стаціонар і потім на 10 - 12-й день захворювання;
· кілька крапель крові наносять на предметне скло для приготування препарату «товстої краплі» крові.
назофарингеального слиз
назофарингеального слиз з задньої стінки глотки беруть натще або через 3 - 4 години після їжі стерильним ватним тампоном. Матеріал беруть з обов'язковим надавливанием шпателем на корінь язика для найбільш повного відкриття глоткового отвору. Тампон вводять ватним кінцем догори за м'яке піднебіння в носоглотку і проводять 2 - 3 рази по задній стінці. При вилученні з носоглотки тампон не повинен торкатися навколишніх тканин (зуби, слизова щік, мову, піднебінний язичок). Після вилучення з носоглотки міститься на тампони слиз засівають на чашки (сироватковий агар і сироватковий агар з лінкоміцином) або поміщають в транспортну середовище для негайної доставки в лабораторію. Допускається застосування готових поживних транспортних середовищ, дозволених до застосування в Україні в установленому порядку.
Доставка і зберігання матеріалу
Матеріал для бактеріологічних і серологічних досліджень доставляють у бактеріологічну лабораторію негайно після відбору в спеціальних контейнерах, здатних підтримувати температуру 37 ° С. При неможливості швидкої доставки матеріалу з відділення в лабораторію (нічний час, вихідні та святкові дні та ін.) Матеріал хранят наступним чином:
· посіви ліквору на первинній чашці з «шоколадним» агаром і в 0,1% -м напіврідкому живильному агарі, а також посів крові на гемокультуру зберігають в умовах термостата при 37 ° С;
· нативний ліквор і кров для серологічних досліджень зберігають в умовах холодильника при 4 ° С. У лабораторії нативний ліквор використовують тільки для бактеріоскопії і постановки серологічних реакцій (латекс-аглютинація, ВІЕФ та ін.). Для бактеріологічного посіву зберігався в холодильнику нативний ліквор не використовують.
Методи дослідження
Мазок нативного ліквору
На предметне скло наносять краплю ліквору з обложеного після центрифугування шару і висушують при кімнатній температурі або в умовах термостата при 37 ° С. Далі на препарат наносять барвник (водно-спиртовий розчин метиленової сині) і після 2-хвилинної експозиції проводять ретельне, але обережне промивання водопровідною водою. Препарат підсушують і микроскопируют під іммерсіей при великому збільшенні, переглядаючи не менше 20 полів зору або до виявлення морфологічно чітких мікробних клітин.
Культуральний мазок за Грамом в модифікації Калини
На знежирене скло наносять краплю стерильного фізіологічного розчину. У ньому суспензіруют культуру і туди ж петлею вносять краплю спиртового розчину зеленки. Після підсихання препарат фіксують над полум'ям. Потім на препарат наливають основний барвник. Час експозиції 1,5 - 2,0 хв. Після цього фарбу зливають і скло в похилому положенні промивають водою. Далі препарат в похилому положенні відмивають спиртом до відходження хмарок фарби і негайно промивають водою. Потім проводять докрашіваніе препарату водним розчином фуксину протягом 2 хв, після цього остаточно промивають водою і просушують. Культуральний мазок переглядають під іммерсіей при великому збільшенні: грамнегативнібактерії виглядають яскраво-рожевими, грампозитивні - синьо-чорними.
Мазок препарату «товста крапля» крові
На середину предметного скла наносять краплю крові і розподіляють за допомогою чистого стерильного апликатора так, щоб діаметр мазка відповідав величині п'ятикопійкової монети. Скло залишають в горизонтальному положенні до підсихання крові. Даний фрагмент дослідження виконують безпосередньо біля ліжка хворого при його надходженні в стаціонар. Далі препарат доставляють у бактеріологічну лабораторію. Забарвлення мазка виробляють водно-спиртовим розчином метиленової сині протягом 2 - 3 хв, без попередньої фіксації. Після фарбування препарат обережно промивають водою і підсушують на повітрі. Препарат дивляться під іммерсіей при великому збільшенні, переглядаючи не менше 20 полів зору або до виявлення морфологічно чітких мікробних клітин.
Бактеріологічний посів
При відборі та посіві досліджуваного матеріалу слід дотримуватися таких вимог: виключити випадкову контамінацію матеріалу сторонньою мікрофлорою і не допустити загибелі збудника з моменту взяття матеріалу для аналізу і до початку роботи з ним в лабораторії. Перша умова забезпечують правильним забором ма...
