теріалу, точним доступом до вогнища інфекції, дотриманням асептики; другий -Доставки зразків або посівів в лабораторію негайно в теплому вигляді або тимчасове збереження до доставки в умовах термостата при 37 ° С протягом не більше ніж 12 год.
Бактеріологічний посів СМЖ
Первинний бактеріологічний посів СМЖ на чашку з «шоколадним» агаром виконують безпосередньо «біля ліжка хворого» в стаціонарі після проведення пункції. Чашки з живильним середовищем, так само як і всі необхідні для забору патологічного матеріалу приналежності (порожні стерильні пробірки, пробірки з 0,1% -м напіврідким сироватковим агаром, стерильні предметні скельця для приготування препарату «товста крапля» крові, флакони з поживними середовищами для посіву крові) в достатній кількості зберігають у профільному відділенні стаціонару або їх негайно (при необхідності) доставляють з бактеріологічної лабораторії. Допустимим умовою зберігання ємностей з поживними середовищами є температура побутового холодильника (4 ° С). Термін зберігання - не більше 7 днів. Перед пункцією ємності з поживними середовищами дістають з холодильника і витримують при кімнатній температурі не менше 10 хв. Після проведення пункції безпосередньо з пункційної голки виконують посів СМЖ на чашку з «шоколадним» агаром. Чашку обережно відкривають і на поверхню середовища закопують кілька крапель ліквору (3 - 4 краплі). Далі чашку закривають, ставлять на рівну поверхню і за допомогою декількох кругових рухів чашки по поверхні столу краплі ліквору розподіляють по поверхні агару. Після того як СМЖ вбереться (зазвичай 2 - 3 хв), необхідно зафіксувати дно і кришку чашки (наприклад пластиром) для того, щоб не виникло її випадкового відкриття. Посів СМЖ в пробірку з 0,1% -м напіврідким сироватковим агаром проводять відразу після пункції. Для цього безпосередньо з пункційної голки 5 - 6 крапель СМЖ вносять в пробірку з 0,1% -м напіврідким сироватковим агаром. Слід вказати на те, що якщо безпосередньо біля ліжка хворого зроблений посів СМЖ з вищевикладеного способу, то етап посіву нативної СМЖ в лабораторії слід виключити, при цьому доставлену в лабораторію стерильну СМЖ досліджують тільки бактеріоскопічну і серологічними методами. Ємності з посівами до доставки в лабораторію зберігають в умовах термостата при 37 ° С або негайно доставляють у бактеріологічну лабораторію. У бактеріологічній лабораторії посіви інкубують при 37 ° С протягом 24 - 48 год в атмосфері, що містить 5 - 10% СО2 (ексикатор зі свічкою, СО2-інкубатор). При наявності росту на щільних живильних середовищах проводять візуальну оцінку вирослих колоній, готують мазок за Грамом, визначають оксидазу, каталазу і залежно від отриманого результату проводять подальшу ідентифікацію збудника і визначення чутливості до антибіотиків. При наявності ознак зростання в 0,1% -м напіврідкому сироватковому агарі проводять висів на чашки з «шоколадним» агаром. Культивацію посівів і подальший хід досліджень проводять так само, як описано вище.
Бактеріологічний посів крові
Посів крові виконують у флакони з «двофазної» живильним середовищем у співвідношенні крові до рідкої фазі 1:10 для зменшення бактерицидного ефекту людської сироватки. «Двофазна» живильне середовище містить X, V фактори росту і вітаміни. На ній добре ростуть менінгококи, пневмококи, гемофільна паличка та інші менш вимогливі до складу живильного середовища мікроорганізми.
Представляється перспективним використання готових «двофазних» середовищ для посіву крові, дозволених до застосування в Україні в установленому порядку. Ці середовища збалансовані за поживними властивостями, збагачені різними ростовими добавками, містять речовини, инактивирующие дію сироватки крові та антибіотиків, мають оптимальний газовий склад.
Засіяну у відділенні кров доставляють у лабораторію і інкубують протягом 5 діб при температурі 37 ° С. Посіви щодня проглядають на наявність мікробного росту. Ознаками росту мікробів на «двофазної» середовищі служать помутніння рідкого середовища, наявність пластівчасті осаду, газоутворення, освіта плівки. Часто зміни «рідкої» фази середовища супроводжуються зростанням колоній на «щільної» фазі середовища.
У зв'язку з тим, що зростання деяких мікробів не призводить до візуально помітних змін прозорості і кольору рідкої фази живильного середовища рекомендується виконати посів на «шоколадний» агар через 48 год інкубації, навіть незважаючи на відсутність ознак росту мікробів у флаконі. При негативному результаті посіву слід продовжити инкубирование флакона.
У разі виявлення росту мікроорганізмів в «двофазної» живильному середовищі, флакон розкривають і з бульйону або виросли на твердій фазі колоній готують мазок, забарвлений за Грамом. За результатами мікроскопії виконують висів на чашки з «шоколадним» агаром для виділення менінгоко...
