) - структурно близький до вітаміну Е, по дії й активності схожий з ним. Утворює окислювально-відновну систему убіхінон-Убіхінол. Основна частина внутрішньоклітинного убихинона міститься в мітохондріях, ядрі, ЕПР і лізосомах.
Найважливіша роль внутрішньоклітинного убихинона пов'язана з участю в мітохондріальної ланцюга транспорту електронів у дихальному ланцюзі, що зумовлює його дію як регулятора антиоксидантного гомеостазу в клітці.
Убихинон і його аналоги ефективно інгібують супероксіданіон-радикал, гідроксильний радикал, перекисні і алкоксильной радикали і, крім того, перехоплюють радикали токоферолу (вітамін Е), є одним з основних сироваткових інгібіторів синглетного кисню.
Жиророзчинні гідрофобні антиоксидантні сполуки відіграють чільну роль у захисті основних структурних компонентів біологічних мембран, фосфоліпідів або занурених у ліпідний шар білків [12], [13].
1.4 Методи дослідження антиоксидантів
В даний час більшістю авторів методи визначення
антиоксидантної активності класифікуються: за способами реєстрації проявляється АОА (волюмометріческіе [14], фотометричні [15], хемілюмінесцентні [16], флуоресцентні [17], електрохімічні [18]); за типом джерела окислення; за типом окисляемого з'єднання; за способом вимірювання окисленого соединення.
Однак найбільш відомими методами визначення антиоксидантної активності є:
TEAC (trolox equivalent antioxidant capacity): метод заснований на наступній реакції:
метміоглобін + Н 2 О 2? Феррілглобін + ABTS? ABTS * + АТ.
Метод визначення еквівалентів Тролокса (TEAC) заснований на здатності антиоксидантів відновлювати радикальні катіони 2,2 -азінобіса (ABTS) і тим самим інгібувати поглинання в довгохвильовій частині спектру (600 нм). Істотним недоліком методу є двоступенева реакція отримання радикала. Це подовжує час проведення аналізу і може збільшити розкид результатів, незважаючи на те, що для аналізу використовують стандартизований набір реактивів [19].
FRAP (ferric reducing antioxidant power): метод заснований на наступній реакції:
Fe(III)-Трипиридитриазин+АО?Fe(II)-Трипиридилтриазин.
Железовосстанавлівающая/антиоксидантна здатність (FRAP) [20]. Тут використовується реакція відновлення Fe (III) -тріпіріділтріазіна до Fe (II) -тріпіріділтріазіна [21]. Однак цим методом неможливе визначення деяких антиоксидантів, наприклад глутатіону. Цей метод дозволяє пряме визначення низькомолекулярних антиоксидантів. При низьких рН відновлення Fe (III) -тріпіріділтріазінового комплексу в Fe (II) -комплекс супроводжується появою інтенсивно блакитного забарвлення. Вимірювання засновані на здатності антиоксидантів пригнічувати окислювальний ефект реакційних частинок, що генеруються в реакційній суміші. Цей метод відрізняється простотою, швидкістю і невеликими витратами при виконанні.
ORAC (oxygen radical absorbance capacity): метод заснований на наступній реакції:
(II) + H 2 O 2? Fe (III) + OH * + AO? OH * + люмінол.
Визначення здатності абсорбувати кисневі радикали (ORAC). У цьому методі реєструють флуоресценцію субстрату (фикоеритрина або флуоресцеїну), яка виникає в результаті його взаємодії з АФК. Якщо в досліджуваному зразку є антиоксиданти, то спостерігають зменшення флуоресценції у порівнянні з контрольним зразком [23]. Спочатку цей метод був розроблений доктором Гохуа Као в Національному інституті старіння в 1992 р У 1996 році доктор Као об'єднався з доктором Рональдом Прайєр в спільну групу в Дослідницькому центрі старіння USDA, де був створений напівавтоматичний метод [24].
4 TRAP (total radical trapping antioxidant parameter) [25]: метод заснований на наступній реакції:
+ AO? AAPH * + ФО (ФЕ).
У цьому методі використовують здатність антиоксидантів взаємодіяти з пероксильних радикалом 2,2 - азобіс (2-амідінопропан) дигідрохлорид (Аарне). Модифікації TRAP полягають у способах реєстрації аналітичного сигналу. Найчастіше на завершальній стадії аналізу пероксі-радикал Аарне взаємодіє з люминисцирует (люмінол), флуоресціюючим (діхлорфлюоресцін-діацетат, DCFH-DA) або іншим оптично активним субстратом.
В якості стандарту для методів TEAC, ORAC і TRAP використовують водорозчинне похідне вітаміну Е - Trolox (6-гідрокси - 2,5,7,8-тетраметілхроман - 2-карбокси кислоту).
Останнім часом для оцінки антиоксидантної активності зріс інтерес до застосування електрохімічних методів. Ці методи володіють високою чутливістю, швидкістю аналізу.
Оцінку антиоксидантної активності...
