азухах верхніх листків, утворюють колосовидне суцвіття у верхній частині стебла [1,12].
5.1.2 Мікроскопічні діагностичні ознаки
Лист ісопу лікарського дорзовентральном типу. Клітини нижнього епідермісу листа сільноізвілістостенние, продихи численні, діацітного типу. На верхньому і нижньому епідермісі листа у великій кількості розташовані округлі 8-клітинні ефірномаслічниє залізяки з радіально розташованими видільними клітинами і одноклітинної округлої ніжкою. На верхньому і нижньому епідермісі листа часто зустрічаються головчатиє волоски з одноклітинної кулястої головкою і короткою одноклітинної ніжкою.
Клітини верхнього епідермісу зі слабко звивистими стінками, продихи великі, рідкісні. Верхній епідерміс і край листа характеризуються наявністю простих колпачковідних волосків, що складаються з 2-3 клітин з тонкими стінками і злегка бородавчастої поверхнею, термінальна клітина бечевідно вигнута. (Малюнок 6.1)
Черешок в поперечному перерізі округло-трикутний, з одним великим провіднихпучках в центрі. Стебло непучкового типу будови, луб'яні волокна не утворюють компактних пучків; по гранях стебла одноклітинні і дво-, трехклеточние однорядні волоски. Епідерміс віночка і по краю чашечки опушен 2-3 клітинними простими бородавчастими волосками, є багато ефіроолійних залозок [1,11,12].
Малюнок 6.1 - Будова верхньої (А) і нижньої (Б) епідерми листа ісопу лікарського: 1 - епідермальні клітини; 2 - залозистий волосок; 3 - простий волосок; 4 - замикаючі клітки продихів; 5 - ефірномаслічная залозками (? 200)
5.1.3 Якісний аналіз
У якості одного з методів ідентифікації можна запропонувати найбільш популярний метод - тонкошарову хроматографію [13,14]. Даний метод є досить сучасним, легко відтворюваним і дозволяє протягом короткого часу і з високою точністю ідентифікувати сполуки, що входять до складу ЛРС, шляхом порівняння з еталоном.
Випробуваний розчин. Близько 1,0 г подрібненої сировини (точна наважка), що проходить крізь сито з отворами діаметром 1 мм поміщають в колбу місткістю 250 мл, додають 100 мл спирту етилового 70%, приєднують до зворотного холодильника і нагрівають на киплячій водяній бані протягом 60 хвилин. Після охолодження до кімнатної температури спиртове витяг акуратно зливають в колбу. Сировина в колбі заливають 50 мл хлороформу, нагрівають на киплячій водяній бані із зворотним холодильником протягом 60 хвилин, потім охолоджують. Хлороформних витяг фільтрут через паперовий фільтр в мірну колбу вместимость 100 мл, а витяг хлороформом повторюють ще раз, збираючи фільтрат в ту ж мірну колбу. Доводять хлороформом до мітки, перемішують. Паралельно готують стандартний розчин урсоловой кислоти [3].
Платівка : ТШХ пластинка із шаром силікагелю.
Рухома фаза . Найкраще поділ відбувається в системі петролейний ефір - хлороформ - кислота оцтова (10: 4: 0,4). Також можна використовувати такі системи розчинників, як гексан - етилацетат (2:
), хлороформ - етилацетат (9:
). (Додаток 1)
Прояв . Вологі пластинки обприскують 20% -м розчином кислоти сірчаної, потім нагрівають в сушильній шафі протягом 8-10 хвилин при температурі 110 ° С. Зони адсорбції речовин тритерпенових природи і свідка забарвлюються в рожево-вишневий колір, що переходить в блакитний [3].
Також хлороформні і спиртові витяги з сировини ісопу лікарського дають позитивну якісну реакцію Лібермана-Бурхарда і Лафоном на тритерпенового систему ядер [3]. Отже, дані кольорові реакції також можна віднести до методів ідентифікації.
Реакція Лібермана - Бурхардтом : сухий залишок розчиняють у крижаній оцтової кислоти і додають суміш оцтового ангідриду з концентрованої сірчаної кислотою (1:
). Спостерігають рожеве забарвлення, що переходить в зеленій, потім в синє.
Реакція Лафоном: до водного витяганню додають концентровану сірчану кислоту і етиловий спирт (у рівних обсягах), потім додають краплю розчину сірчанокислого заліза. При нагріванні з'являється синьо-зелене забарвлення.
5.2 Показники доброякісності і методи їх визначення
Можливість застосування в медичній практиці трави ісопу лікарського викликає необхідність встановлення показників доброякісності. Стандартизацію лікарської рослинної сировини ісопу доцільно проводити за основним діючим речовинам, що обумовлює його фармакологічесікую активність: флавоноидам і полісахаридів.
Кількісне визначення флавоноїдів у сировині ісопу лікарського про...