і G 2 -піками. Висота цього прямокутника визначається числом клітин, припадають на 10 центральних каналів області S-фази, з якого обчислюється середнє число клітин на канал. Аналогічним способом можна визначити частку анеуплоїдних клітин в S-фазі за умови, що висоту прямокутника (рис.1, Б) можна обчислити, використовуючи ту частину гістограми, яка не перекривається з областю, що відповідає диплоїдним клітинам. В
3. Аналіз параметрів клітинного циклу
Завдяки фундаментальним дослідженням в галузі експериментальної біології та клінічної медицини були отримані факти, що стосуються кінетики клітинного циклу.
До теперішнього часу вже накопичено певний досвід роботи з даного питання. Практично не існує жодного органу або тканини людського організму, експериментального тварини, який б не піддавався цитометричного або цитоспектрофотометрическому аналізу. На підставі цих даних встановлено, що вміст ДНК нормальних соматичних клітин відповідає диплоїдний набір хромосом (2с) і характеризується одним модальним класом на ДНК-гістограмі. Значення цього параметра для одного і того ж індивіда може коливатися в межах 30%. Найбільш виражені варіації у змісті ДНК спостерігаються в клітинах проліферуючих органів - печінки і селезінки. Ці дані були отримані при визначенні вмісту ДНК в ядрах клітин різних органів і тканин фенотіческі здорових людей (130 проб - по 5 - 14 від кожного випадку) (E.Muller, R.Weidhase, 1983). p> У досліджуваних об'єктах схематично представлені фази мітотичного циклу і розподіл ДНК у різних тканинах. Розраховувалася кінетика клітинної проліферації, а в патологічно зміненому органі - ступінь вираженості процесу, особливо у випадку ракової пухлини.
Завдяки використанню в дослідженнях скануючих і проточних цитофотометрії визначено важливі дані, що стосуються класифікації клітин по фазах мітотичного циклу, а також отримані результати, що дозволяють оцінити тривалість і дисперсію відповідних фаз циклу G 1 , S, G 2 + M.
Однопараметрична аналіз кінетики клітинного циклу з вивчення вмісту ДНК показав можливості кількісної цитометрії і відкрив широкі перспективи щодо його використання для дослідження та поглиблення знань по досліджуваному питанню.
В даний час з'явилися дані, які значно розширюють традиційне подання, що стосується розподілу клітин в чотирьох послідовних фазах циклу. Одночасне вивчення двох параметрів - ДНК і білка, ДНК і РНК - дає істотно більше інформації про кінетику клітинного циклу, оскільки дозволяє розділити зливаються фази циклу, такі, як G 0 + G 1 , G 2 + M, а також ідентифікувати додаткові фази в пресинтетичному (G 1 ) і постсинтетическом (G 2 ) періодах. При аналізі Пресинтетичний періоду в експерименті та клінічному матеріалі була показана можливість використання АТ (ДНК і РНК) для додаткової класифікації G 1 -періоду на GIQ, GIA, ...
