ким же сорбентом, але меншого розміру: вводять проби розчинів різної концентрації та обсягу і вибирають співвідношення, що дозволяє навантажити колонку найбільшою кількістю зразка при достатньому для збору препаративних фракцій в чистому вигляді поділі. Розчин зразка повинен бути ретельно профільтрованний і не містити суспензій твердих частинок, у тому числі і випадаючих в процесі його зберігання до кінця препаративної роботи. Доцільно для оберігання колонки від можливого забруднення такими частками ввести в систему фільтр малого обсягу між інжектором і препаративної колонкою. Потрібно намагатися проводити всю препаративну роботу в максимально стислі терміни, оберігаючи розчин зразка і зібрані фракції від тривалого контакту з повітрям, світлом і підвищеної температурою. Чим нижче температура і менше термін зберігання розчину, чим швидше відганяється розчинник від зібраних фракцій, тим чистіше виходять зібрані речовини і легше вся подальша робота з ними.
Особливе місце в препаративної ВЕРХ займає ексклюзіонная хроматографія макромолекул. Цей метод використовують у попередньому варіанті для виділення цільових речовин або їх груп з сумішей, що містять компоненти з помітно
различающейся молекулярної масою. Виняткову важливість цей метод має для очищення лабільних біополімерів. Так, на препаративних колонках з TSK-гелями SWG за один введення можна очистити 100-200 мг ферментів. Розроблено технологію приготування високоефективних препаративних колонок для ексклюзіонной хроматографії синтетичних полімерів. Це дозволило вирішити одну з найбільш важких проблем дослідження полімерів - швидке отримання вузьких фракцій, необхідних для дослідницьких цілей і для калібрування аналітичних систем. Особливо важливим є те обставина, що цим методом можна Фракціоновані практично будь-які полімери, в той час як класичні методи фракціонування не тільки незрівнянно більш трудомісткі, але і малопридатні для розділення багатьох об'єктів, зокрема, зразків з молекулярною масою до 10 000 - 30000.
Слід зазначити, що при поділі синтетичних полімерів не можна сильно перевантажувати колонку. За рахунок вязкостного ефекту спостерігається сильний зсув утримуваних обсягів, що різко погіршує якість одержуваних фракцій. Проте продуктивність процесу досить висока. Так, при Препаративна поділі на колонці розміром 250х21, 5 мм з зорбаксом-сил ефективністю близько 10000 т.т. при единовременном введенні 200 мг зразка етилену з вінілацетату (обсяг дози 8 мл, концентрація 2,5%) поділ закінчувалося за 5 хв при швидкості рухомої фази (тетрагидрофуран) 16 мл/хв. Така швидкість поділу дозволила за робочий день Фракціоновані 8 г сополимера навіть без застосування автоматичного дозатора з ручним відбором фракцій кожні 20 с. Характеристики отриманих фракцій представлені в табл. 3.1. p> Ці результати показують, що в обраних умовах вдалося отримати досить вузькі фракції сополимера з молекулярною масою більше 3000. Дві останні фракції асиметричні і мають...
