Па, а довірчий інтервал, в якому знаходитиметься вказане оптимальне значення складе кПа.
На біодоступність харчових мінералів великий вплив робить не тільки їх рівень у продуктах харчування, а й багато в чому і характеристики дієти, у складі якої вони надходять в травний тракт. Продукти ферментативного гідролізу харчових речовин в шлунково-кишковому тракті, утворюють міцні, погано розчинні комплекси з металами, перешкоджають їх всмоктуванню і, отже, знижують їх біодоступність. Саме тому останнім часом для підвищення засвоюваності мікроелементів стали застосовувати хелатирующие речовини. Одним з представників такого роду хелатора є казеїнові фосфопептіди (СРРs). СРРs - це фосфорильовані пептиди, які утворюються з казеїнів коров'ячого молока при їх переварюванні травними протеиназами.
Відомо, що металлосвязивающая здатність СРРs залежить від ступеня фосфорилювання, яка, в свою чергу, пов'язана з типом казеїну і способом ферментативного гідролізу. Виділення СРРs включає стадію ферментативного гідролізу натрієвого казеината панкреатичними протеиназами. Існує думка, що для виділення СРРs можна проводити ферментацію казеїну натрію різними протеиназами. Однак це призведе до розбіжностей у амінограмма, і як наслідок, до різних здібностям зв'язувати мінерали.
З метою отримання гідролізату з максимальним вмістом низькомолекулярних фосфорильованих пептидів і вільних амінокислот, здатних надалі утворювати розчинні комплекси з мінеральними речовинами, нами були вивчені гідролізати казеината натрію отримання з використання різних ферментів.
При отриманні казеїнових фосфопептідов застосовували схему одностадійного гідролізу казеината Na з використанням пепсину, трипсину, химозина і хімотрипсину при різній тривалості гідролізу та відповідних для кожного ферменту значеннях рН.
Отримання гідролізатів проводили за різних умов взаємодії фермент: субстрат - 1:50, 1:100, 1: 200, 1:400. Гідроліз проводили при 37 ° С протягом 24 ч. Для визначення оптимального часу гідролізу реакцію зупиняли через кожні 2 год прогреванием протягом 20 хв при 80 ° С. Ступінь гідролізу визначали кількістю низькомолекулярних білкових компонентів, що не загрожених дворазовим об'ємом 5% ТХУ, що утворилися після ферментативного гідролізу. Визначення білка проводили за методом Лоурі. Результати досліджень представлені в таблиці 5.
В результаті досліджень (таблиця 1) було визначено оптимальний час гідролізу казеината натрію. Встановлено, що для більшості ферментів при співвідношенні фермент: субстрат 1: (200-400) для ферментації достатньо 4-6 год, в подальшому не спостерігається збільшення ступеня гідролізу. Винятком є ??трипсин - максимальна глибина його гідролізу досягається вже через 4 год при співвідношенні фермент: субстрат 1: 100.
Далі вивчали зміни молекулярно-масового розподілу пептидних фракцій у складі ферментолізатов, отриманих в ході гідролізу, проведеного за оптимальних умов.
Молекулярні склади гідролізатів представлені в таблиці 6.
Таблиця 5 - Ступінь гідролізу казеината натрію при використанні різних ферментів
ФерментСоотношеніе фермент: субстратВремя гідролізу, ч24681024пепсин1:502728303031311:1005459687070701:2007588898989891:400749090909090трипсин1:504554656768681:1007596969696961:2008895969797971:400899697979797химозин1:502426262627271:1002526262628281:2007887878888881:400828889898989химотрипсин1:503234363838381:1005762687272721:2007...
