вина і визначити його вміст у біологічному матеріалі.
Фотометричні прилади
Фотометрія (абсорбціометрія) - метод якісного та кількісного аналізу, заснований на вимірюванні інтенсивності поглинання або розсіювання речовиною світлового потоку.
Світлопоглинання або екстинкція, відповідно до закону фотометрії Ламберта-Бугера-Бера прямо пропорційно концентрації поглинаючої речовини, товщині шару розчину і молярному коефіцієнту екстинкції (Е). Останній являє собою поглинання розчину речовини концентрацією 1моль/л, поміщеного в кювету з товщиною шару 1см, і вимірюється в л В· моль-1 В· см-1. br/>В
Рис. 1. Загальний вигляд колориметра фотоелектричного концентраційного
1 - гальваномер; 2 - кришка кюветного відділення, 3 - ручка установки В«грубоВ», 4 - ручка установки В«точноВ», 5 - ручка чутливості; 6 - ручка кюветодержатель; 7 - перемикач светофільров.
Часто використовують і інший показник - питомий коефіцієнт екстинкції Е1см1%, тобто поглинання світла 1%-ним розчином речовини в кюветі з товщиною шару 1см. Для визначення вмісту якого компонента біологічного матеріалу будують калібрувальний графік, що відображає залежність між екстинкція (Е) і концентрацією (С) цієї речовини в розчині і представляє собою пряму лінію в прямокутній системі координат. p align="justify"> Для фотометричного аналізу використовують фотоелектроколориметри, фотоелектроколориметри-нефелометрія і спектрофотометри.
Фотоелектроколориметри (ФЕК) різних моделей застосовують для аналізу світлопоглинання забарвлених розчинів речовин у видимій області спектру (рис.1).
Фотоелектроколориметри-нефелометрія застосовують для вимірювання інтенсивності світлорозсіювання або послаблення світлового потоку досліджуваних речовин в каламутних середовищах.
Колориметр фотоелектричний концентраційний дозволяє завдяки великому набору вузькосмугових світлофільтрів проводити вимірювання в певній області спектра в діапазоні довжин хвиль 315-980 нм. Цей прилад використовують для визначення світлопоглинання речовин, а також коефіцієнт пропускання розсіюючих суспензій, емульсій і колоїдних розчинів у прохідному світлі. Порядок роботи викладено в інструкції. br/>В
Рис. 2. Загальний вигляд спектрофотометра
Спектрофотометри (рис.2) використовують для вивчення будови, якісного та кількісного аналізу речовини за інтенсивністю поглинання його в монохроматичному світлі. У клініко-біохімічних та наукових дослідженнях широко застосовуються спектрофотометри СФ-16, СФ-26, СФ-46 і їх сучасні модифікації, що працюють в області спектра від 186 до 1100 нм. p align="justify"> Правила роботи на спектрофотометрі викладені в інструкціях до приладу.
флуоріметріческой прилади
Для якісного та кількісного аналізу речовин, які, поглинаючи енергію, здатні до люминисценции (флуоресценції) застосовуються флуороскопа і Флуоріметри.
флуороскопа дозволяє проводити Напівкількісний аналіз шляхом візуального порівняння інтенсивності флуоресценції досвідченого розчину зі стандартним, де концентрація речовини відома.
Флуоріметри дозволяють проводити кількісний аналіз. У цих приладах виділення області спектра, необхідного для порушення даної речовини, здійснюється первинними світлофільтрами, а пропускання характерного для нього ділянки випромінювання (світіння) - за допомогою вторинних світлофільтрів. p align="justify"> Центрифуги
Центрифугування - метод розділення суміші компонентів рідких середовищ під дією відцентрової сили. Його використовують для відділення формених елементів крові від плазми, для осадження і виділення клітин з сечі, спинно-мозкової рідини та інших середовищ організму, а також для відділення опадів від рідкої фази (надосадова рідина, або супернатант). У клініко-біохімічних лабораторіях для цієї мети використовують малогабаритні центрифуги загального призначення. Вони дають максимальну швидкість близько 6000 об В· хв-1. p align="justify"> Для спеціальних біохімічних досліджень застосовують ультрацентрифуги з охолодженням (рефрижераторні), наприклад ЦР-2-25, УЦП-1-75 та ін Вони дозволяють проводити диференціальне центрифугування, тобто поділ часток, що відрізняються один від одного розмірами і щільністю.
Швидкість осадження частинок визначається відцентровим прискоренням, яке зазвичай виражають в одиницях g (гравітаційна постійна, рівна 980 см В· с-2). Величину g позначають як відносне відцентрове прискорення. Вона залежить від швидкості обертання ротора (п, про В· хв-1) і відстані (r, см) від осі обертання ротора до середини стовпчика рідини в пробірці і визначається за формулою
= 1,11? 10-5n2r
На практиці...
