ання його на холоді. У перший день петлею, шпателем або безпосередньо тампоном роблять посіви на кров'яний агар і елективні для стафілококів середовища (желточно-сольовий (ЖСА) або молочно-желточно-сольовий агар (МЖСА)). Чашки з посівами інкубують при температурі 37 ° С протягом 48 годин, або добу в термостаті і додатково 24 години при кімнатній температурі при хорошому освітленні. Якщо в досліджуваному матеріалі бактерій мало (дані мікроскопії) - то для збагачення роблять ще в тиогликолевой середу. На другий день проводять висів із цукрового бульйону на зазначені елективні середовища, досліджують масивність росту і характер колоній після посівів інших матеріалів. На кров'яному агарі стафілококи утворюють непрозорі, злегка опуклі колонії середніх розмірів з гладкою, блискучою, немов полірованою поверхнею, чітко окресленим краєм, маслянистої консистенції. Патогенні штами утворюють навколо колоній прозорі зони гемолізу. На елективних-диференціальних середовищах, як правило, виростають тільки колонії стафілококів. Зокрема, на желточно-сольовому агарі вони утворюють колонії із зоною помутніння навколо них і характерним райдужним віночком по периферії. На молочно-желточно-сольовому агарі виявляють наявність пігменту, який може бути золотистим, палевим, білим, жовтим, помаранчевим і іншим. З усіх типів колоній виготовляють мазки, фарбують за Грамом і мікроскопіруют, проявляючи типові грампозитивні стафілококи. Не менш двухтіпічних або підозрілих відносно стафілококів колоній пересівають на скошений агар. У першу чергу відсівають колонії з гемолізом і ті, які дали позитивну лецітовітелазную реакцію. Пробірки з посівами поміщають у термостат при температурі 37? С на 18-20 годин. У наступні дні проводять ідентифікацію виділених чистих культур, для чого перевіряють їх морфологічні і тинкторіальних властивості (забарвлення по Граму).
Біологічне дослідження
Патогенні стафілококи, що викликають харчові токсикоінфекції виділяють і ідентифікують так само, як і стафілококи взагалі. Вони відрізняються здатністю продукувати ентеротоксини, що характеризують термостабильностью і антигенної специфічністю. Найчастіше зустрічаються типи A і D. Зазначені токсини отримують шляхом посіву культури в спеціальну напіврідку середу і інкубують 3-4 діб при 37? вексікаторе з 20% CO2. Середовища пропускають через мембранні фільтри. Отримані фільтрат прогрівають при 100? C 30 хв і вводять поросятам внутрибрюшинно або через зонд в шлунок. Через 30-60 хвилин виникає блювота, пізніше пронос і загальне прострація. Щоб виявити ентеротоксин в харчових продуктах, які спричинили токсикоінфекцію, ними годують поросят. Останнім часом ідентифікації та типування ентеротоксінов проводять з помошью реакції імунопреціпітаціі в агарових гелі. Це найпростіший і чутливий метод.
Серологічне дослідження
Проводиться дослідження тоді, коли збудника не вдається виявити, наприклад, при хронічних процесах (остеомієліт, септикопіємії) особливо якщо вони довго лікуються антибіотиками. Серед сучасних серологічних реакцій часто використовують РПГА, ІФА. [5]
1.5 Пневмококки
Пневмококки - парні коки, пов'язані з сімейства Streptococcaceae, до роду Streptococcus, які виявляються у верхніх дихальних шляхах здорових і хворих людей. Пневмококки одні із збудників гострої пневмонії. Бактерії виду Streptococcus pneumonia
зазвичай бувають овальної або сферичної форми, розміром 0,5-1,25 мкм, частіше парні, іноді поодинокі або у вигляді коротких ланцюжків. Дистальний кінець кожної пари бактерій загострений і має форму ланцета. При первинному виділенні володіють чітко вираженою полисахаридной капсулою, яка відмежована від оболонки, що містить М- протеїновий антиген. Молоді культури пневмококів грамположительни, але старі культури можуть ставати грамнегативними. Полімерні компоненти клітинної стінки складаються в основному з пептидоглікану і кислотного комплексу, складових Видоспецифічні субстанцію. [6]
Культуральні властивості.
Пневмококки - факультативні анаероби, але добре ростуть і в аеробних умовах при температурі 37 ° С. На простих середовищах культивуються. Їх вирощують на середовищах з додаванням крові або сироватки. На кров'яному агарі утворюють дрібні прозорі росинки колоній, оточені зоною позеленіння.
На рідких середовищах викликають слабке помутніння з осадом. Біохімічно активні, розкладають ряд вуглеводів до кислоти, желатин НЕ розріджують. Вірулентні пневмококи розкладають інсулін і розчиняються в жовчі, що використовують для їх ідентифікації. Вони продукують гемотоксін, лейкоцідін, гіалуронідазу, а також мають ендотоксин. Вірулентні властивості пневмококів, в основному, визначають капсули, які пригнічують фагоцитоз.
1.6 Дослід...
