ження пневмокока
Бактеріоскопічне дослідження
Бактеріоскопічне дослідження матеріалу (крім крові) зводиться до виготовлення двох мазків. Один з них фарбують за Грамом, другий за Буррі-Гінс, що дозволяє виявити капсулу. Пневмококки розташовуються у вигляді ланцетоподібним диплококів, оточених загальною капсулою. Якщо в полі зору виявляють 10 і більш типових диплококів, можна з великою ймовірністю зробити висновок про наявність S.pneumoniae. Однак, первинна мікроскопія не дає права поставити остаточний діагноз, оскільки в мазках можуть бути капсульні непатогенні диплококки - представники нормальної мікрофлори. Тому потрібно проводити посів клінічного матеріалу і виділяти чисту культуру.
Бактеріологічне дослідження
При бактеріологічному дослідженні, при сепсисі сіють 10 мл крові у флакон, що містить 100 мл сироваткового або цукрового бульйону, інкубують 18-20 годин при температурі 37 ° С, потім висівають на кров'яний агар, виділяють і ідентифікують чисту культуру. При менінгіті ліквор центрифугують і з осаду роблять посів на кров'яний агар. На ньому пневмококи ростуть у вигляді маленьких круглих колоній, оточених зеленою зоною, в центрі колонії видно характерне вдавление. Посів мокроти або гною на живильні середовища робити недоцільно, оскільки присутній сапрофітна мікрофлора пригнічує ріст S.pneumoniae. Краще досліджуваний матеріал ввести в черевну порожнину білих мишей. Постановка біопроби - швидкий, надійний і точний метод виділення чистої культури пневмококів. Білі миші дуже чутливі до цих бактерій і вже через 10-12 год після зараження пневмококи проникають в кров і паренхіматозні органи, викликаючи сепсис. Посів крові з серця або шматочків внутрішніх органів під час розтину тварин дозволяє виділити чисту культуру збудника. Для ідентифікації пневмококів використовують такі їх властивості. На відміну від інших видів стрептококів, S.pneumoniae не росте на середовищі з оптохіном, ферментує інулін і дуже чутливий до дії жовчі. Швидкий лізис пневмококів під дією жовчі можна виявити, якщо до 1 мл бульонной культури додати 0,5 мл жовчі. Через 15-20 хвилин перебування в термостаті настає повний лізис бактеріальних клітин. Для визначення сероварів пневмококів (зараз їх налічується 85) використовують реакцію аглютинації на склі з типовими сироватками або феномен набухання капсул raquo ;. У присутності гомологичной сироватки капсула пневмококів сильно набрякає. Ще краще проводити серотипування за допомогою комерційних реагентів в реакціях латекс-аглютинації або коаглютинації, завдяки яким виявляють капсульні антигени. [5]
1.7 Менігококкі
Менінгококи - збудник менінгіту, менінгокок - Neisseria meningitidis (AlbertetGhon 1903 році, Murray 1929) диплококк, має майже правильну круглу форму; його розміри від 0,6 - 1,0 мкм. Добре забарвлюється аніліновими барвниками, грамотріцатель. Клітини розташовуються парно; їхні звернені один до одного поверхні злегка сплощені; зовні помітна капсула. При культивуванні на поживних середовищах капсула втрачається. Капсули і вії грають роль факторів вірулентності: перші сприяють стійкості менінгококів до фагоцитозу, другі - їх прикріпленню до епітелію. Тришарова клітинна стінка мікроба складається з білків, глікопротеїнів, ліпідів і липополисахарида. Менінгокок нерухомий, спор не утворює, мало стійкий до зовнішніх впливів, проте підвищена вологість повітря (80-90%), наявність захисних колоїдів сприяє збереженню його життєздатності. Під впливом дезінфектантів у вигляді розчинів фенолу (1%), хлораміну (0,01%), перекису водню (0,1%) менінгокок гине за 2-3 хвилини; він чутливий до пеніциліну і його похідним, левоміцетину, еритроміцину; чутливість його до тетрацикліну і сульфаніламідів значно знизилася. [7]
Культуральні властивості.
менінгокок - факультативний анаероб, оптимальна температура розмноження 37 ?, pH середовища 7.2-7.6. Культивується на поживних середовищах з додаванням нативних білків - крові або сироватки людини та інших ссавців. В якості вуглецю та азоту менінгококи використовують амінокислоти (глута, таурин, аспаргін, L-аргініл, гліцин тирозин), які необхідно включати в середу культивування. Середа Мюллера-Хінтона є безсивороточной середовищем, де міститься повний набір амінокислот і м'ясної екстракт. Для отримання великої маси мікроорганізмів менінгокок культивують при підвищеному вмісті вуглекислого газу (7-10%). На щільних живильних середовищах менінгокок формує безбарвні, опалесцентні, плоскі, круглі колонії 0,5-1,5 мкм з рівним краєм. У сироватковому бульйоні зростає, утворюючи рівномірну каламуть, через 3-4 дні на поверхні середовища з'являється ніжна плівка. Ферментує глюкозу, мальтозу з утворенням кислоти без газу, не розріджує желатин, володіє оксидазною активністю. Не здатні синтезувати полісахар...
