повторювали перемішування меду з новою порцією ефіру. Ефірні витяжки об'єднували і давав ефіру випаруватися під тягою при температурі не вище 30 оС. До залишку додавали 2-3 краплі розчину резорцину.
Поява рожевого або оранжевого кольору протягом 5 хв свідчить про наявність оксиметилфурфурола. Швидке зникнення з'явився рожевого забарвлення в розрахунок не приймається.
. Діастазну (амілазна) активність.
Метод заснований на колориметричному визначенні кількості субстрату, розщепленого в умовах проведення ферментативної реакції, і подальшому обчислюванні диастазного числа.
Діастазне число характеризує активність амілолітичних ферментів меду.
Діастазне число висловлюють кількістю кубічних сантиметрів розчину крохмалю масовою часткою 1%, яке розкладається за 1 год амилолитическими ферментами, що містяться в 1 г безводного речовини меду.
см3 розчину крохмалю відповідає 1 одиниці активності.
Апаратура й реактиви:
Колориметр фотоелектричний, забезпечений світлофільтром максимумом пропускання при довжині хвилі 582 або 590 нм.
рН-метр з ціною поділки ОД рН по БД.
Електрод вимірювальний скляний.
Баня-термостат водяна на 20 і 40 оС.
Пробірки скляні діаметром 20 мм і висотою 200 мм по ГОСТ 25336.
Ваги лабораторні 1-го або 2-го класу точності з найбільшою межею зважування 200 г за ГОСТ 24104.
Бюретка місткістю 25 см3 ціною поділки 0,1 см3 за ГОСТ 29252.
Піпетки виконань 1,2,4,5 і 6 місткістю 1,2 і 5 см3,2-го класу точності за ГОСТ 29228.
Колби мірні виконань 1, 2 місткістю 50 см3 за ГОСТ 1770.
Секундомір за НД.
Крохмаль розчинний для йодометрії за ГОСТ 10163, ч., розчин масовою часткою 0,25%.
Кислота оцтова льодяна по ГОСТ 61, х.ч., розчин концентрації с (СН3СООН)=0,2 моль/дм3.
Натрій уксуснокислий трехводний по ГОСТ 199, х.ч., розчин концентрації с (CH3COONa)=0,2 моль/дм3.
Натрій хлористий по ГОСТ +4233, ч.д.а., розчин концентрації с (NaCl)=0,1 моль/дм3.
, 4-динітрофенол, ч.д.а. за НД.
Йод, розчин концентрації 0,015 моль/дм3 за НД.
Розчин буферний стандартний з рН, близькою до 5,0 для перевірки скляного електрода по ГОСТ 8.135.
Вода дистильована за ГОСТ +6709;
Підготовка до випробування:
. Приготування ацетатного буферного розчину концентрації 0,2 моль/дм3 з рН 5,0 готують, змішуючи одну об'ємну частину розчину оцтової кислоти і три об'ємні частини розчину оцтовокислого натрію. В отриманому буферному розчині розчиняють 2,4-динітрофенол з таким розрахунком, щоб його концентрація в комбінованому реактиве склала 0,05%. Перевіряють рН розчину потенціометрично і в разі відхилень від рН 5,0 показник коректують, додаючи розчин оцтової кислоти концентрації 0,2 моль/дм3 або розчин оцтовокислого натрію концентрації с (СН3 COONa)=0,2 моль/дм3.
. Приготування комбінованого реактиву: комбінований реактив готують з восьми об'ємних частин розчину крохмалю, п'яти об'ємних частин буферного розчину з 2,4 - Дінітрофенол і однієї об'ємної частини розчину хлористого натрію.
При приготуванні комбінованого реактиву в кількості, рівній або більшому 1 дм3, обсяг відповідних розчинів відмірюють з похибкою не більше 0,5 см3.
Отриману суміш ретельно струшують.
Комбінований реактив зберігають при кімнатній температурі не більше 3 міс.
. Приготування розчину меду: 5 г меду, зваженого з похибкою не більше 0,01 г. розчиняють у дистильованій воді в мірній колбі місткістю 50 см3. 1 см3 такого розчину містять 0,1 г меду.
. Приготування розчину крохмалю: 0,25 г крохмалю, зваженого з похибкою не більше 0,001 г, розмішують в стаканчику місткістю 50 см3 з 10 - 20 см3 дистильованої води і кількісно переносять у конічну колбу, де не сильно кипить 80 - 90 см3 дистильованої води.
Кипіння триває 2-3 хв. Колбу охолоджують до 20 оС, вміст кількісно переносять у мірну колбу місткістю 100 см3 і доводять до мітки. Проведення випробування: у суху пробірку відміряли з бюретки 14,0 см3 комбінованого реактиву. Пробірку закривали гумовою пробкою і перешкодили на 10 хв у водяну баню при температурі 40 ° С. Потім у пробірку вносили піпеткою 1,0 см3 розчину меду. Вміст примушували п'ятикратним перевертанням, і пробірку знову поміщали на водяну баню, одночасно включаючи секундомір. Пробірку витрим...
