ним може виявитися також виявлення в клітинах характерних мембранних систем, властивих окремим групам бактерій, а так само включень. Першорядне значення для систематики бактерій надається забарвленні клітин по Граму і будовою їх клітинних стінок. Вивчення фізіолого-біохімічних властивостей включає встановлення способу харчування і типу енергетичного метаболізму досліджуваних культур. Важливо визначити такі ознаки, як відношення бактерій до молекулярного кисню, температурі, pH середовища, солоності, освітленості та іншим факторам середовища. У дану групу ознак входить також перелік субстратів, утилізованих в якості джерел вуглецю, азоту та сірки, потреба у вітамінах та інших факторах росту, утворення характерних продуктів метаболізму, наявність деяких ферментів [12, 9].
Найбільш активними деструкторами ПГА визнані гриби, включаючи Ascomycetes, Basidiomycetes, Deuteromycetes, Zygomycetes, Mixomycetes, Penicillium, Fusarium [38,16,32]. Більш високий деградаційний потенціал грибів пов'язують з більшою рухливістю грибних ПГА-деполімераз в порівнянні з ПГА-деполімерамі, екскретіруемие бактеріями [47].
Автори більш ранніх робіт показали, що в досліджуваних умовах в грунті переважають деструктори короткоцепочечних ПГА, тоді як чисельність мікроорганізмів, що розщеплюють среднецепочечние ПГА невелика, від 0,8 до 18% від виявлених деструкторів [41,54].
Слід зазначити, що при виявленні деструкторів ПГА аналізують середовища (грунт, компост, вода), в яких експонували зразки полімерів, і мікроорганізми, виділені з плівок обростання на поверхні полімерів, висіваючи їх на стандартні мікробіологічні середовища. При цьому серед аналізованих мікроорганізмів можуть бути присутніми організми-комменсали, утилизирующие мономери та інші продукти руйнування високомолекулярних ПГА, які з'являються в середовищі завдяки життєдіяльності первинних і істинних ПГА-деструкторів. Для виділення істинних деструкторів ПГА необхідно використовувати метод прозорих зон, який передбачає висів проб на мінеральний агар, що містить в якості єдиного джерела вуглецю ПГА. Зростання на такому середовищі мікроорганізмів, що володіють ПГА-деполімеразной активністю, супроводжується утворенням навколо колоній на поверхні агаризованому середовища характерних прозорих зон як результат руйнування полімеру [39].
Серед морських мікроорганізмів-деструкторів ПГА ідентифіковані бактерії Pseudoalteromonas sp. NRRL B - 30083, Marinobacter sp, NK - 1, Alcaligenes faecalis AE122, актиноміцети Nocardiopsis aegyptia, Streptomyces sp. SNG9; доведена їх здатність секретувати екзодеполімерази і утилізувати гомогенний П3ГБ й сополімери П3ГБ/3ГВ. [30, 32, 54, 56]
Глава 2. Об'єкти і методи дослідження
2.1 Об'єкти дослідження мікробної деградації в прісній воді
Об'єктом дослідження в даній роботі були прісноводні тропічні бактерії, що володіють здатністю до біодеградації ПГА.
Матеріалом для дослідження служили зразки полігідроксіалканоатов (ПГА) двох типів - гомополимера 3гідроксімасляной кислоти (П3ГБ) і сополимера 3-гідроксимасляної і 3гідроксівалеріановой кислот (П3ГБ/3ГВ), які мають близькі фізико-хімічні властивості. Зразки поміщали в чохли з дрібнопористий млинового газу і занурювали на глибину 0,3-0,5 м в штучне водоймище на кліматичної випробувальної станції (м Нячанг, В'єтнам) (Малюнок 1).
Малюнок 1 -
