зку. Однак оборотність реакції, особливо в кислої і лужної середовищах і в присутності водних рухливих фаз, у великій мірі обмежувала як термін роботи таких сорбентів, так і області їх застосування.
Пізніше були розроблені методи отримання щеплених фаз різного типу з використанням набагато більш міцних і стійких до гідролізу зв'язків Si-О-Si і Sj-С. Практично всі наявні у продажу прівітофазние сорбенти відносяться до цього типу, їх більш 200. Прищепити хімічно фазу до силікагель може будь висококваліфікований хімік-органік за наявними прописами. Однак приготувати сорбент, відтворений від партії до партії, надзвичайно важко, це не завжди вдається навіть володіє як патентами, так і В«ноу-хауВ» лабораторіям і виробництвам фірм-виробників. Ще більш проблематичною є спроба відтворити в лабораторії якийсь фірмовий сорбент за наявними літературним і патентним даними; безліч нюансів у підготовці вихідного силікагелю, розчинників і реагентів, проведенні реакції, видаленні непрореагировавших реагентів і побічних продуктів зводять шанси на удачу майже до нуля. Точно так само проблематичним є використання при відтворенні описаних в літературі розділень В«аналогівВ» сорбентів інших форм, що в першу чергу відноситься до складних поділи та використанню звернення-фазних сорбентів. Сказати В«використовувався звернення-фазний сорбент, який представляє собою октадецілсілан, щеплений до силікагель В», - значить не сказати майже нічого, якщо не вказана фірма-виробник. Численні описані в літературі випадки інверсії порядку виходу піків сумішей на різних сорбентах В«С18 на силікагеліВ» та інших або навіть повної адсорбції ряду речовин на іншому сорбенті підтверджують цей факт.
Проте щеплено-фазні сорбенти зараз найбільш популярні, незважаючи на їх високу вартість і зазначені недоліки. Більше 60% розділень методом ВЕРХ (за іншими даними-більше 70%) виконують з використанням тільки звернення-фазних щеплених сорбентів, основним з яких є сорбент з прищепленої фазою C18.
Можна відзначити наступні переваги, що забезпечують переважне використання щеплених сорбентів на основі силікагелю: механічна стійкість до високих тисків; відсутність переходу прищепленої фази в розчинник в процесі хроматографічного розділення (Якщо не протікають реакції, що призводять до хімічного отщеплению прищепленої фази); стійкість до дії розчинників, температури, води, рН; швидкість встановлення рівноваги при зміні елюенту, що забезпечує оперативність роботи і можливість роботи в градієнтному режимі з швидким поверненням до початкового режиму; можливість варіювати в широких межах селективність за рахунок зміни ступеня щеплення, додаткової хімічної обробки і заміни розчинника.
Так як серед початківців працювати в області ВЕРХ дуже великий відсоток складають фахівці з ГХ, має сенс зробити наступне зауваження. Дуже великий асортимент нерухомих фаз (невиправдано великий, на думку багатьох компетентних учених) у ГХ і прагнення мати якомога ширший вибір фаз і...
