в ВЕРХ-основна помилка початківців. Якщо в газовій хроматографії, принаймні в її класичному варіанті, рухома фаза практично не робить впливу на селективність поділу, то в рідинної хроматографії її вплив велетенський. Так як в поділі дуже активно беруть участь як прищеплена фаза, так і адсорбовані (Абсорбовані) компоненти рухомої фази, широкий асортимент сорбентів для ВЕРХ в більшості випадків не потрібний. Зміною складу рухомої фази дуже часто легко домогтися тієї ж селективності, що і за рахунок застосування нового дорогого щеплено-фазного сорбенту. Наведене вище твердження не відноситься, звичайно, до принципово нових варіантів сорбентів для ВЕРХ (Наприклад, особливо шірокопорістим, призначеним для роботи з великими молекулами, такими, як білки). Для початківця ж працювати в ВЕРХ рекомендується ретельно вивчити 2-4 сорбенту, що знаходять застосування для його об'єктів дослідження, і широкий асортимент розчинників і добавок різного типу, їх вплив на поділ даного класу речовин на обраній групі сорбентів. Тільки після того, як придбаний досвід роботи з прищепленими фазами в комплексі з розчинниками, але є завдання, які не вдається вирішити за їх допомогою, слід пробувати нові щеплені фази. Справедливість даного зауваження якраз і підтверджується тим, що 60-70% успішних розділень, описаних в літературі, проведено тільки на щеплених фазах одного типу - звернення-фазних, до розгляду яких ми зараз і перейдемо.
Найбільш популярними є так звані звернені щеплені фази, застосовувані в обернено-фазною ВЕРХ. Поняття В«зверненийВ» прийшло від класичної ЖХ на силікагелі, де у В«прямійВ» системі рухома фаза неполярна. а нерухома полярна (відповідно гексан і силікагель). За цим принципом В«зверненаВ» система повинна мати полярну рухливу фазу і неполярну нерухому (відповідно водний метанол і октадецілсілан на силікагелі, щеплений хімічно). Назви обернено-фазний сорбент і обернено-фазна система не є особливо вдалими або зрозумілими, проте так як це назва загальноприйнято, то ми будемо його дотримуватися.
Поверхня силікагелю, як відомо, - досить велика і розвинена (зазвичай 100-600 м 2 /г), і у випадку гідроксильованого силікагелю покрита в основному силанольними групами, що мають концентрацію близько 5 на 1 нм 2 поверхні. Розрахункова максимальна щільність силанольних груп на поверхні кілька вище і становить близько 8 на 1 нм 2 . Повне гідроксилювання поверхні силікагелю досягається шляхом його обробки водою при кипінні в протягом кількох годин.
Для отримання обернено-фазної сорбенту гідроксильованого силікагель зазвичай обробляють хлорсіланов, які вступають в реакцію досить активно і утворюють при цьому стійкі до гідролізу зв'язку - Si-О-Si-С-Несмотдя на гадану простоту процесу, виявилося, що є численні складності. Спочатку вважали, що всі гідрофільних силанольних групи вступлять в реакцію з утворенням мономолекулярного шару прищепленої фази. На практиці виявилося, що не всі г...
