кула мРНК завідомо експресованого в НФ та відомого досліднику гена. На модельному експерименті з Salmonella typhimurium показано, що вказаний метод можна рекомендувати для виявлення життєздатних НФ різних бактерій у навколишньому середовищі. p align="justify"> Практична значимість: Розроблено два варіанти кількісної аналізу результатів полімеразної ланцюгової реакції, засновані на іммобілізації ПЛР-продуктів на твердому носії з наступним кількісним визначенням иммобилизованного матеріалу і включають наступні етапи:
) введення молекулярної мітки в ампліфікований фрагмент;
) специфічне зв'язування ампліфікованого фрагмента з метою відокремлення його від компонентів реакційної суміші;
) кількісну детекцию мітки. Методи характеризуються різним рішенням етапів аналізу і можуть бути використані для виявлення бактерій в зразках різної природи, в тому числі і в клінічній діагностиці. У даній роботі методи застосовано для виявлення НФ і кількісної оцінки числа бактерій Yersinia pseudotuberculosis і Salmonella typhimurium в субстратах зовнішнього середовища. У поєднанні з бактеріологічним методом вони дозволяють диференціювати НФ збудників і кількісно оцінювати їх концентрацію в грунтах і водоймах. [4]
4. Індуктори НС
При створенні експериментальних систем, що одержали назву мікрокосмів, моделюються чинники природного середовища проживання (температура, вода різного складу і солоності, аерація, видиме світло). Висловлено припущення, що температура +0,5 - +7 оС є основним чинником, що індукують освіта НФ, як це було показано для Campylobacter jejuni, V. cholerae [4]. Перехід в НС залежить не тільки від температури культивування, але і від виду мікроорганізму, його фізіологічного стану, супутніх факторів. V. cholerae eltor переходили в НС при сприятливій температурі (25оС), але в присутності високою концентрацією солей.
Навіть незначні варіації хімічного складу середовища при оптимальній температурі можуть індукувати перехід в НС. Так, наприклад, при порівнянні двох зразків питної води, один з яких індукував освіта НФ Agrobacterium tumefaciens і Rhizobium meliloti, було виявлено, що зразки збігалися по 39 хімічним елементам і відрізнялися тільки вмістом міді. У пробі, яка позитивно впливала на освіту НФ, концентрація міді була в кілька разів вище. p align="justify"> Серед хімічних індукторів НС в окрему групу слід виділити антибіотики, так як ці відомості мають практичне значення. У модельних експериментах in vivo показаний перехід в НФ E. coli у присутності ципрофлоксацину M. tuberculosis - ріфалізіла в комбінації з ізоніазидом. Проліферація може бути оборотно втрачена під впливом концентрацій хлору, застосовуваних для знезараження води, у зв'язку з чим пропонується переглянути бактеріологічні критерії оцінки якості питної води [5]. p align="justify"> Наведені...
