юються водою з невеликою добавкою азиду натрію (бактериостатика).
Інструкції зі зберігання колонки можуть зазначатися в її паспорті.
. Зберігання водних буферів. У разі проведення рутинних визначень буває досить зручно готувати відразу великий обсяг водного буфера для приготування рухомої фази. На жаль, водний буфер не може зберігатися більше декількох днів, якщо не додати в нього азид натрію, бактериостатик. Дуже погано зберігаються рухливі фази на основі фосфатного буфера.
Іноді великий обсяг водного буфера готують для того, щоб «підвищити відтворюваність аналізу». Взагалі кажучи, при такому підході вопроізводімость аналізу не підвищується, а от проблеми із зберіганням буфера з'являються неминучі.
Взагалі ж кажучи, відповідь на питання - чи готувати водний буфер на тиждень або на один день?- Визначається виключно принципом зручності.
. Регулярність проведення калібрування. Як правило, калібрування за стандартом проводять щодня, або ж кожен раз при приготуванні нового елюенту.
Калібрування проводиться при досягненні стаціонарного стану хроматографічної системи; зчитуваними параметрами є час утримування піку стандарту, його площа (при спектрофотометричному детектировании - на опорній довжині хвилі), спектральні відносини (при застосуванні скануючого або діод-матричного спектрофотометрического детектора).
На початку роботи стандарт може бути проаналізований двічі - для підтвердження відтворюваності часом утримування.
1. Визначення компонентів препарату «БІЦИЛІН - 3» методом ВЕРХ
Бициллин - 3 є пеніциліном пролонгованої дії і являє собою суміш натрієвої, новокаїнової і бензатіновой солей бензилпеніциліну (БП). За чинною ВФС 42-3034-98 визначення БП в препараті проводять за допомогою ВЕРХ, новокаїн визначають спектрофотометрично, а бензатин (N, N1-дібензілетілендіамін) екстрагують ефіром з водного розчину, насиченого хлоридом натрію. Після випарювання ефіру бензатин визначають титруванням хлорного кислотою.
В Європейській Фармакопеї зміст БП і бензатину в бензатіновой солі БП визначають за допомогою градієнтної ВЕРХ в суміші метанолу з розчином фосфату натрію при р?? 3,5.
Мета роботи - розробка методу ВЕРХ в ізократіческом режимі для визначення компонентів в Біциліну - 3.
Експериментальна частина
Використовували бициллин - 3 виробництва АКО «Синтез» (Курган). Дослідження проводили на хроматографі фірми «Waters» (США) з насосом моделі 510, УФ-детектором моделі 481 і інжектором моделі 7125 (Rheodyne) з дозуючої петлею місткістю 50 мкл. Для детектування використовували довжину хвилі 214 нм, при якій добре детектируются всі аналізовані сполуки. Реєстрацію хроматограмм і розрахунок площ піків і основних параметрів утримування проводили за допомогою персонального комп'ютера з аналого-цифровим перетворювачем і програмою «Мультіхром».
Був вивчений обращеннофазний варіант методу ВЕРХ на колонці «Luna C18 (2)» розміром 250 х 4,6 мм фірми «Phenomenex» (США), оскільки колонка зарекомендувала себе раніше як відносно дешева з поліпшеною симетрією виходу піків органічних амінів. З цією ж метою в якості рухомої фази використовували суміш ацетоніт...
