и захворюваннями та посилення заходів по боротьбі з внутрішньолікарняними інфекціями» [Наказ № 720, 1978].
2.1 Об'єкти дослідження
Об'єктами дослідження з'явилися матеріали від хворих реанімаційного і кардіохірургічного відділень ККБ: змив з бронхів, слизова зіву, слизова носа, кров та ін.
Всього за час роботи в бак. лабораторії було досліджено 355 проб патологічного матеріалу (249 проб в реанімаційному відділенні і 106 проб у відділенні кардіології).
2.2 Середовища для культивування мікроорганізмів
Всі об'єкти, що надходять від хворих, висували на спеціальні середовища для подальшого дослідження.
Для посіву зразків матеріалу від хворих досліджували наступні ПС:
кров'яний агар: готували 2% агар, рН 7,4-7,6. До розплавленого і охолодженого до 45 о С агару, дотримуючись правил асептики, додавали 5 мл живильного середовища (дефибринированной баранячої, кінської або кролячої крові; цитратной або дефибринированной крові людини без антибактеріальних препаратів). Суміш ретельно перемішували, щоб не утворилося піни, розливали у стерильні чашки Петрі, попередньо підігріті в термостаті, шаром 3-4 мм. Зберігали не більше двох тижнів в целофанових мішках при 4-6 о С.
цукровий бульйон: до 100 мл живильного бульйону (рН 7,2-7,4) додавали 1 г глюкози. Стерилізували поточним парою 3 дні підряд по 30 хвилин або при 0,5 атм. 30 хвилин.
желточно-сольовий агар (ЖСА) для виявлення стафілококів: по прописи, зазначеної на етикетці, готували 1,8-2% агар, рН 7,2-7,4, охолоджували до 45-50 про С і додавали 20% желточной суспензії (асептично витягнутий з яйця жовток збовтували з 200 мл ізотонічного розчину хлориду натрію). Агар ретельно змішували з желточной суспензією по 20 мл в чашки Петрі.
середу Ендо: готували з сухого порошку по прописи, зазначеної на етикетці банки. Склад порошку: сухий мясопептонний агар, лактоза, основною фуксин, сульфіт натрію. Середу готували в день її використання. Гарячу середу розливали у стерильні чашки Петрі і залишали до застигання на поверхні столу. Зберігали чашки з середовищем не більше 3 днів у темному місці або в холодильнику. Дана середу застосовується для виявлення бактерій групи кишкових паличок.
Середа Хью-Лейфсона: до 1 л дистильованої води додавали 2 г пептона, 5 г хлориду натрію, 3 г агар-агару. Суміш підігрівали до розплавлення агару. Потім додавали 0,3 г До 2 НРО 4 і 10 г глюкози. Продовжували кип'ятити 2-3 хвилини, подщелачивать 20% розчином гідроксиду натрію до рН 7,4-7,5, доводили об'єм середовища до початкового і додавали 3 мл 1% -ного водного розчину бромтимолового синього. Стерилізували при 0,5 атм. 20 хвилин.
середу Сабуро: на 1 л дистильованої води додавали 10 г пептона і 18 г агар-агару. Нагрівали до розплавлення агару, додавали 40 г глюкози. Стерилізували при 0,5 атм. 30 хвилин.
Середа Кінг А: до 2 г пептона додавали агар-агару 1,5 г, гліцерину 1 мл, сульфату калію 1 г, хлориду магнію 0,14 г, води дистильованої до 100 мл, pH 7, 2. Стерилізували при 0,5 атм. протягом 15 хв., потім розливали в чашки.
2.3 Методи ідентифікації мікроорганізмів
Ідентифікація бактерій роду Pseudomonas
Серед досить великого числа мікроорганізмів, що входять в цей рід, найбільше значення для медицини представляють види P. aeruginosa , P. putida , P. cepacia , P fluorescens , які є збудниками різних гнійних поразок і часто мають госпітальний характер. Характерною особливістю більшості штамів є позитивний тест на освіту цитохромоксидази, а також утворення різних пігментів. Всі види, що входять в цей рід, каталазопозитивні, дають негативні реакції на індол, не реагують з метиловим червоним і не утворюють ацетілметілкарбінола.
Хід дослідження:
Перший день. Проводять посів на живильні середовища: поживний агар, кров'яний агар, агар Ендо, інкубують при 37 о С протягом 18-24 годин.
Другий день. Переглядають і відзначають колонії, підлягають подальшому і вивченню. Розрізняють п'ять морфологічних типів колоній:
плоскі колонії неправильної форми;
колонії, що нагадують кишкову паличку;
складчасті («квітка маргаритки»);
слизові, рідко дають пігментацію при первинному виділенні;
карликові, які з'являються тільки через 18 годин.
На кров'яному агарі навк...
