палички на середовищі Хейфеца середу змінює свій колір з червоно-фіолетового в жовтий, який потім може змінюватися до салатно-зеленого.
Виявлення грамнегативних паличок, специфічно змінюють колір рідких диференційно-діагностичних середовищ і створюючих характерні колонії на елективних середовищах з лактозою, вказує на наявність бактерій групи кишкової палички.
Визначення бактерій з роду сальмонел в 25 г продукту
Суть методу полягає у визначенні характерного зростання сальмонел на елективних середовищах та встановленні біохімічних і серологічних.
Наважку продукту масою 25 г від об'єднаної проби вносили у флакон Сокслета, що містить 100 куб. см середовища збагачення (Мюллера, Кауфмана, хлорістомагніевой середовища М). Рідина у флаконі повинна піднятися до мітки 125 куб. см. Флакони ретельно струшували і поміщали в термостат з температурою 37 ° С. Через 16-24 год після ретельного перемішування за допомогою бактеріологічної петлі (діаметр 0,4-0,5 мм) або пастерівської піпетки проводили посів з середовища збагачення в чашки Петрі з попередньо підсушеної середовищем Ендо, БФА, Плоскірєва, Левіна або вісмут-сульфіт-агар (за вибором).
Чашки з посівами поміщали в термостат з температурою 37 ° С; посіви переглядали через 16-18 годин. На середовищі Ендо бактерії з роду сальмонел утворюють безбарвні або з рожевим відтінком колонії.
На середовищі БФА сальмонели утворюють великі, гладкі, червонуватого відтінку прозорі колонії (колонії сальмонели тіфі суїс, як і на середовищі Ендо - дрібні). Бактерії групи кишкової палички утворюють колонії жовто-зеленуватого кольору. Бактерії групи протея дають зростання через 72 години.
На середовищі Плоскірєва сальмонели ростуть у вигляді безбарвних колоній, але колонії більш щільні і трохи меншого розміру, ніж на середовищі Ендо.
На середовищі Левіна сальмонели ростуть у вигляді прозорих, блідих ніжно-рожевих або рожево-фіолетових колоній.
На вісмут сульфитном агарі сальмонели ростуть у вигляді чорних або коричневих колоній з характерним металевим блиском. При тому спостерігається прокрашивание в чорний колір ділянки середовища під колонією. Виняток становлять деякі серологічні типи з групи С, які на цьому середовищі ростуть у вигляді ніжних світло-зелених або сірувато-зелених колоній.
Ізольовані колонії, характерні для бактерій з роду сальмонел, пересівали на Трьохцукровий агар Крумвіде-Олькеницького в модифікації Ковальчука штрихом по скошеної поверхні і уколом в стовпчик. Посіви поміщали на 12-16 годин на термостат з температурою 37 ° С.
При зростанні бактерій з роду сальмонел колір скошеної поверхні середовища Крумвіде-Олькеницького в модифікації Ковальчука - рожевий, стовпчик - жовто-бурий; газоутворення встановлюють по наявності тріщин і розриву стовпчика агару, сероводородообразующіе - викликають потемніння стовпчика.
Інші грамнегативні бактерії дають такі зміни кольору середовища:
Бактерії групи кишкової палички - вся середовище забарвлюється в синій або синьо-зелений колір з утворенням газу або без нього;
- Бактерії з групи протея - середовище забарвлюється в яскраво-червоний колір, може утворитися чорний осад;
Шигели і збудники черевного тифу - косяк забарвлюється в рожевий колір, стовпчик - в синій, або синьо-зелений.
Допускається замість середовища Крумвіде-Олькеницького в модифікації Ковальчука посів на вуглеводні середовища в короткий строкатий ряд, включаючи середовища з глюкозою, лактозою, сахарозою, манітом, і мальтозою, напіврідкий агар уколом (для визначення рухливості) і бульйон Хоттінгера для визначення освіти індолу і сірководню.
Для подальшої ідентифікації бактерій готували мазки, які фарбували по Граму, микроскопировать і вивчали серологічні властивості мікроорганізмів шляхом постановки пробної аглютинації на предметному склі з агглютинируют адсорбированной полівалентної сальмонеллезной О-сироваткою. При отриманні позитивної реакції на склі з поливалентной сироваткою проводили ідентифікацію за допомогою монорецепторная агглютинирующих О-сироваток.
Встановивши серологічну групу, до якої відносяться досліджувані бактерії, за допомогою Н-сироваток визначали тип бактерій.
Виявлення рухомих (крім S. Pullorum amp; S. Gallinarum) грамнегативних паличок, що дають характерний зростання на елективних середовищах, неферментуючих лактозу і сахарозу, ферментуючих глюкозу і маніт з утворенням кислоти і газу (S. typhi suis не ферментує маніт), що дають позитивну реакцію аглютинації з монорецепторними О - і Н-сальмонеллезньими сироватками, вказує на наявність бактерій з роду с...
