альмонел.
Визначення бактерій групи протея
Суть методу полягає у визначенні морфології та росту на живильних середовищах, здатності гідролізувати сечовину і утворювати сірководень.
Для підтвердження наявності зростання протея в Н-формі 0,5 куб. см аналізованої суспензії вносили в конденсаційну воду свіжоскошеного мясопептонного агару, розлитого в широкі пробірки, не торкаючись середовища (метод Шукевича). Вертикально поставлені пробірки поміщали в термостат з температурою 37 ° С. Через 18-24 год посіви переглядали. Звертали увагу на освіту повзучого вуалеподібного нальоту з блакитним відтінком; на скошеному мясопептонном агарі культура піднімається з конденсаційної рідини вгору по поверхні середовища. При появі характерного росту мікробів роду протея, микроскопировать забарвлені по Граму мазки і вивчали рухливість мікробів в роздавленою або висячої краплі.
Для виявлення нероящиеся О-форм можна проводити посів на поверхню агару Плоскірєва. О-форма протея зростає на цьому середовищі у вигляді прозорих колоній, злегка подщелачівающіх середу, фарбуючи її в жовтий колір. Робили пересівши матеріалу з підозрілих колоній в середу Крумвіде-Олькеницького в модифікації Ковальчука, де за наявності бактерій з групи протея середовище забарвлюється в яскраво-червоний колір (внаслідок розщеплення сечовини) і може утворюватися чорний осад з можливим розривом агарового стовпчика (внаслідок утворення сірководню).
Виявлення поліморфних грамнегативних паличок, що утворюють характерний зростання на середовищах в Н-формі (рухливі) і О-формі (нерухомі), ферментуючих глюкозу і сечовину, неферментуючих лактозу і маніт, вказує на наявність бактерій з роду протея.
Визначення коагулазоположітельних стафілококів
Суть методу полягає у визначенні морфології, характеру росту на живильних середовищах і в здатності окремих стафілококів ферментувати лецитиназу і коагулювати цитратную плазму крові кролика під впливом ферменту коагулазу.
З розведення аналізованої суспензії продукту (1/10) проводили посіви на молочно-сольовий агар, що містить 6,5% хлористого натрію, для виявлення пігменту або желточно-сольовий агар, що містить 6,5% хлористого натрію , для виявлення лецитиназної активності.
Взвесь наносили на поверхню агару в кількості 0,2 куб. см і рівномірно розтирали по всій поверхні агарового середовища.
Посіви термостатіровать протягом 24 год при температурі 37 ° С і 24 год витримували при кімнатній температурі.
На поверхні живильного середовища колонії стафілокока мають вигляд плоских або злегка опуклих блискучих колоній з рівним краєм. При цьому на молочно-сольовому агарі краще виявляється пігмент (емалево-білий або золотистий), а на желточно-сольовому агарі колонії стафілококів можуть утворювати райдужний віночок raquo ;, що є однією з ознак їх патогенності.
З підозрілих колоній готували препарати, які фарбували по Граму. При наявності стафілококів в препараті виявляються грампозитивні дрібні коки, розташовані неправильними гронами.
Для підтвердження ознак патогенності стафілококів ставили реакцію плазмокоагуляции. У прилад з 0,5 куб. см цитратной плазми крові кролика, розведеною фізіологічним розчином у співвідношенні 1/4, вносили петлю чистої добової культури стафілокока і ставили в термостат при температурі 37 ° С. Реакцію плазмокоагуляции враховували через 3-4 годин (не струшуючи пробірку) і залишали в термостаті на добу для остаточного обліку через 24 ч.
Для постановки реакції плазмокоагуляции можна використовувати також суху цитратную плазму крові кролика. Реакцію вважають позитивною, якщо плазма коагулюється в згусток.
Для визначення кількості стафілококів враховували колонії стафілококів, що дали позитивну реакцію плазмокоагуляции. При розрахунку на 1 г продукту кількість підрахованих колоній множать на ступінь розведення і ділять на кількість посівного матеріалу.
Визначення клостридій перфрінгенс (сульфіт-відновників)
Суть методу полягає у специфічному зростанні клостридій перфрінгенс в середовищах СЦС або Вільсон-Блера, на яких в результаті відновлення серністокіслого натрію в сірчанокислий натрій відбувається взаємодія з хлористим залізом і утворюється почорнення середовища за рахунок сірчистого заліза.
Проведення аналізу на середовищі Вільсон-Блера. У пробірки, що містять по 9 куб. см розплавленого і охолодженого до температури 45 ° С середовища Вільсон-Блера, вносили стерильною піпеткою по 1 куб. см десятиразових розведень (від 1/10 до 1/1000000) суспензії випробуваного продукту. Посівний матеріал і середу ретельно перемішували. Посіви поміст...
