ового ефіру (LXXX), подальше перетворення диброміду (LXXXI) в диен ( LXXXII), обробку розчину диена в піридині молекулярним киснем і розщеплення епідіоксіда (LXXXIII) гидрированием над каталізатором Ліндлар. Видалення ОН-групи при С - 28 в спирті (LXXXIV) здійснювали перетворенням його в мезілат з подальшим відновленням (LXXXV) літійалюмогідрідом (Схема 12).
Схема 12
. 3.2 Побудова бічного ланцюга з утворенням нових вуглець-вуглецевих зв'язків
Шлях, заснований на використанні 2-літійфурана (Схема 13). Утворюється в цьому випадку аддукт (С) окислен N-бромсукцинімід в лактон (GI) у вигляді нероздільною суміші аномеров, які були перетворені у відповідні етоксіетіловие ефіри з переважанням (СII). Послідовне проведення стадій сполученого приєднання ли-тійметілкупрата до Енан (СII), б-метилювання кетона (GIII), натрій-боргідрідного відновлення карбонільної групи в діметіллактоне (CIV) і розкриття циклу дало тріол (CV). Захист віцінальним діольной угруповання і видалення 27-оксіфункціі гідридним відновленням відповідного мезилату призвели до сформованої бічного ланцюга брассіноліда з сумарним виходом більше 40% в розрахунку на (XXIII).
Схема 13
Глава 4 Знаходження брассиностероидов в природі
З моменту відкриття БС, були виділені від 58 видів рослин, включаючи 49 покритонасінних (12 однодольних і 37 дводольних), 6 голонасінних, 1 папороть (Equisetumarvense), 1 мохоподібних (Marchantiapolymorpha) і 1хлорофіт (Hydrodictyonreticulatum). Таким чином, БС широко поширені в рослинному світі, у тому числі вищих і нижчих рослин.
БС були виявлені у всіх органах рослин, таких як пилок, пильовики, насіння, листя, стебла, корені, квіти, і зерно. Інші цікаві місця знаходження це комахи і корончатий галл (кореневий рак, збудник-гриб Dendrophagus globosus). Для прикладу галли з Castanea crenata, Distylium racemosum або Catharanthus roseus, де були знайдені БС. Ці рослини мають більш високий рівень вмісту брассиностероидов, ніж нормальні тканини. Крім того, в молодих зростаючих тканинах міститься більш високі концентрації БС, ніж у зрілих тканинах. Як правило, пилок і незрілі насіння є особливо багатим джерелом БС, у той час як концентрація у вегетативних тканинах дуже низька порівняно з іншими рослинними гормонами.
У пилку Cupressus arizonica концентрація 6-дезохотіфастерона може бути про +6400 разів більше, ніж брассіноліда. Пилок і незрілі насіння є найбагатшим джерелом з діапазонах 1-100 нг на 1 г сирого ваги, у той час як пагони і листя, як правило, мають більш низькі обсяги 0,01 - 0,1 нг на 1 г сирої ваги. БС синтезуються ендогенно, в досить низьких концентраціях. У порівнянні з пилком і насінням, інші частини рослин містять БС в нанограммових або субнанограммових концентраціях БС на грам сирої ваги. Найвища концентрація БС, 6,4 мг 6-дезохотіфастерона на 1кг пилку, був виявлений в Cupressus arizonica.
Серед БС, кастастерон є найбільш широко розповсюдженим (49 видів рослин), потім брассінолід (33), тіфастерон (24), 6-дезоксокастастерон (19), теастерон (18), і 28-норкастастерон ( 11).
На сьогоднішній день, 34 види інших БС і 5 БС-з'єднань, були знайдені в одного тільки виду рослини. Серед усіх природних БС, кастастерони і брассіноліди найбільш важливі БС, через їх широкого розповсюдження, а також їх потужною біологічної активності.
Таблиця 2. Приклад поширеності і змісту брассиностероидов в рослинах
РастеніеІсточнік виделеніяБрассіностероідСодержаніе,% Chlorophyta (зелені водорості) Кл. Protoccophyceae Сем. Hydrodictuaceae HydrodictionreticulatumЦелое растеніеГомокастастерон 18 епибрассинолида 34Ч10-7 3Ч10-8Gymnospermae (голонасінні) Кл. Pinopsida Pinusthunbergii Piceasitchensis Пилок ПобегіТіфастерін9 Кастастерон Тіфастерін8,9Ч10-6 5Ч10-7 7Ч10-7Angiospermae (покритонасінні) Кл. Dicotyleones Сем. Theaceae TheasinensisЛістьяБрассінолід 1 Кастастерон 5 Теастерон 10 Тіфастерін 9 Брассінон 28 Гомокастастерон 184,6Ч10-10? 1,5Ч10-9 1,1Ч10-8? 1,5Ч10-9 6Ч10-9 1,5Ч10-9 2Ч10-10 4Ч10-11
Багато з ферментів біосинтезу брассиностероидов були виділені і охарактеризовані завдяки мутацій, що призводить до карликовості, відновлюваної брассінолідом. Так, у арабідопсис мутації dwf 1 (від dwarf - карлик) і dwf 6 контролюють ранні етапи біосинтезу (до поділу на ранній і пізній шлях біосинтезу) і володіють найбільш сильним фенотипическим проявом - мутанти досягають не більше, ніж 1/30 висоти рослин дикого типу. Мутація dwf 4 зачіпає більш пізні етапи (після розвилки у метаболізмі), тому фенотипічніпрояв карликовості м'якше.
Відповіді на брассиностероидов були повністю пригнічені у мутанта арабидопсиса bri 1 (brassinisteroidin...
