stify"> Так само, Нікітін Д.І. з колегами вивчав вплив варіації ізотопного складу води на специфічність відгуку бактерій. У своєму досвіді він використовував восьмій середовищ з різною концентрацією важкої води: 0,01; 0,1; 1,0; 5; 20; 50; 70; 90%. Культивування проходило протягом 4-7 діб. Результати впливу важкої води на бактерій оцінювали по кінетиці росту клітин. Отримані дані показали, що в інтервалі досліджених концентрацій дейтерію виявлені дві зони різного впливу на бактерії: перша в інтервалі від 0,01% до 1%, друга при концентрації більше ніж 25%. У зоні малих концентрацій при вмісті дейтерію 0,01% спостерігалася значна активація, зменшується із зростанням концентрації дейтерію і змінилася потім інгібіруваням зростання. При 1% дейтерію вплив або не проявлялося, або виявилося на пізній фазі росту. При 5% дейтерію у воді виявилася обмежена чутливість лише бактерій з домінуванням лецитину. При концентрації дейтерію більше 25% у всіх випадках спостерігалося пригнічення росту [Нікітін, Оранская, Лобишев, 2003].
Семенов К.Т. і Асланян Р.Р. спостерігали за особливостями росту культури одноклітинних водоростей на середовищах з легкою та важкою водою. За отриманими даними, ними було встановлено, що при використанні легкої води замість звичайної для приготування живильного середовища, легка вода стимулювала зростання водоростей на експоненційної фазі кривої зростання, однак до кінця культивування цей ефект практично був відсутній. Важка вода в концентрації 0,5% в живильному середовищі трохи активувала ріст культури і до кінця часу культивування число клітин в досвіді перевищувало контроль на 10%. При концентрації від 2% до 10%, важка вода не чинила на ріст культури статистично значимого впливу. При концентрації важкої води в 20% і більш істотно ингибировал ріст культури [Семенов, Асланян, 2013].
2. Матеріал і методи дослідження
Робота проводилася на базі кафедри генетики, мікробіології та біотехнології Кубанського державного університету в 2012-2014 навчальному році. Зразки легкої води були надані Центром нових промислових технологій Бізнес-інкубатора КубГУ і містили в своєму складі 52 ppm дейтерію.
2.1 Об'єкт дослідження
Об'єктом дослідження послужив штам з колекції нефтеокисляющих бактерій кафедри генетики, мікробіології та біотехнології КубГУ Rhodococcus erythropolis В2. Вибір мікроорганізму був заснований на дослідженнях співробітників кафедри, які показали що даний мікроорганізм здатний утилізувати нафтову плівку більш ніж на 50% і при цьому володіти високою швидкістю росту в рідких середовищах [Біологічна реабілітація земель ..., 2006], висока виділення ПАР і порівняно коротка тривалість культивування до настання стаціонарної фази [Біоремедіація чорноземної грунту ..., 2005].
2.2 Використані живильні середовища
Культивування проводилося на рідких і щільних живильних середовищах. Досліджувані бактерії вирощувалися на твердому живильному середовищі з агаром виробництва ГНЦПМ, м Оболенск (Росія), наступного складу (г/л):
· панкреатичний гідролізат рибного борошна - 24,0
· натрій хлористий - 4,0
· агар мікробіологічний - 12,0
· рН 7,3
Стерилізація живильного середовища проводилася в скляної лабораторної посуді при t=120 ° С і тиску 0,5 атм. протягом 30 хвилин в паровому стерилізаторі ВК - 75-01.
Використовувалася стандартна рідка живильне середовище без джерела вуглецю (г/л):
· KNO 3 - 4,0
· Na 2 HPO 4? 12H 2 O - 1,4
· KH 2 PO 4 - 0,6
· MgSO 4? 7H 2 O - 0,8
· стандартний розчин мікроелементів (з 10 елементів) - 1мл на 1 л середовища. Стерилізація проводилася аналогічно середовищі МПА. І дві модернізовані мінеральні середовища, модернізація полягала в зміні хімічного джерела азоту наступного складу (г/л):
· NH4HCO3 - 1,4
· Na 2 HPO 4? 12 H 2 O - 1,4
· KH 2 PO 4 - 0,6
· MgSO 4? 7 H 2 O - 0,8
· КСl - 3
· стандартний розчин мікроелементів (з 10 елементів) - 1мл на 1 л середовища. Стерилізація проводилася аналогічно середовищі МПА
· (NH 2) 2 CO - 1,7
· Na 2 HPO 4? 12H 2 O - 1,4
· KH 2 PO 4 - 0,6
· MgSO 4? 7H 2 O - 0,8
· КСl - 3
· стандартний розчин мікроелементів (з 10 елементів) - ...
