ії нейтралізації проводять посів розтертого матеріалу в 2 флакона або 2 пробірки з живильним середовищем під шаром вазелінового масла. Збудник правця - суворий анаероб і дуже чутливий до кисню. Мікроб добре росте в глибині рідких поживних середовищ за наявності в них глюкози, шматочків печінки або м'язів (середа Кітта-Тароцці). Для культивування правцевої палички застосовують бульйон Мартена (м'ясо-пептони з додаванням глюкози, підлуженою розчином соди), середу Вейнберга (м'ясний агар). Перед посівом з середовища видаляють кисень шляхом кип'ятіння 15 хв, а потім охолоджують до 40-50 В° С і в неї додають 0,5% глюкози. На чашках з агаром при температурі 35-37 В° С через 2-4 діб зростають окремі прозорі або злегка сіруваті колонії величиною 2-5 мм з нерівною зернистою поверхнею, краю шорсткі, розгалужені. На кров'яному агарі колонія буває оточена зоною гемолізу. Після культивування на 2-е, 4-е, 6-е і 10-у добу мікроскопіруют мазки з посівів і досліджують культуральну рідину на наявність правцевого токсину. Для цього ставлять реакцію нейтралізації з протиправцевої сироваткою. При виявленні в посіві правцевого токсину та наявності грампозитивних паличок з великими спорами дають позитивну відповідь (Додаток 3).
9. Препарати, застосовуються для лікування і профілактики правця
9.1 Правцевий анатоксин
Боротьба з правцем стала можливою шляхом створення штучного активного імунітету у людей тільки після отримання Рамоном правцевого анатоксину в 1923 році. Методика імунізації правцевим анатоксином, застосовувана в даний час, сприяє створенню імунітету.
У Нині для активної імунізації людей випускається очищений сорбованих правцевий анатоксин, для виготовлення якого використовується нативний правцевий анатоксин.
Нативний правцевий анатоксин являє собою фільтрат бульонной культури правцевий палички, знешкоджений тривалим впливом формаліну і тепла. Для отримання правцевого токсину застосовують токсігенний штам Kolle № 154, генерація 8. Культура цього мікроба засівається на середовища, приготовані з м'ясного і казеїнового гідролізату, дріжджового екстракту, висівок і казеїнового гідролізату. До середах додаються двозаміщений фосфорнокислий натрій, однозаміщений фосфорнокислий калій і глюкоза. Культура вирощується при 35 В° C протягом 7 днів, потім фільтрується через стерилизующие азбестові пластини. Отриманий фільтрат - токсин-титрують на білих мишах. У виробництво береться токсин, що містить не менше 100000 DLМ в 1 мл.
Отриманий токсин перевіряють на стерильність. До стерильному токсину додають 0,3-0,4% формаліну і знешкоджують при температурі 37-38 В° C протягом 21-25 днів.
Знешкоджений анатоксин перевіряється на стерильність, нешкідливість, антигенність, визначається його рН, який повинен бути в межах 6,8-7,3, і випробовується імуногенність.
Нешкідливість перевіряють шляхом введення 10 мл анатоксину підшкірно морським с...