обудувати графік залежності вмісту глюкози в крові від вводяться гормонів і часу їх дії. br/>
ГормонДоза гормонаВремя взяття крові після введення гормонаСодержаніе глюкози в крові
У висновках відзначити різницю в дії інсуліну та адреналіну на рівень глюкози в крові тварин і практичне значення роботи.
Практичне значення роботи. Інсулін і адреналін регулюють вміст глюкози в крові, що дозволяє по зміні її концентрації судити про ефект даних гормональних препаратів. У фармації це використовують для стандартизації заводських препаратів інсуліну та контролю його якості. Гіпоглікемічна дія інсуліну використовують для лікування хворих на цукровий діабет, а адреналін застосовують при гіпоглікемічних станах, зокрема, викликаних передозуванням інсуліну. br/>
Робота 84. Кількісне визначення гістаміну в крові з диазотированного n-нітроанілін по Н.В. Клімкін і С.І. Плітману
Реактиви. Диазотированного n-нітроанілін (готують перед вживанням з 0,1%-ного розчину n-нітроаніліна в 0,1 М соляній кислоті, додають до 10 мл охолодженого на льоду розчину n-нітроаніліна 1 мл 4%-ного розчину нітриту натрію); гістамін , стандартний розчин концентрації 200 мкмоль/л; карбонат натрію, 20%-ний розчин; гідроксид натрію, 5 М розчин; трихлороцтової кислота, 10%-ний розчин; універсальна індикаторна папір.
Обладнання. Штатив із пробірками; воронка з паперовим фільтром; скляні палички; водяна баня; піпетки місткістю 1 і 5 мл; ФЕК. p align="justify"> Матеріал. Цільна кров щури або кролика, осаджена 10%-ним розчином трихлороцтової кислоти у відношенні 1:9 для екстракції гістаміну (витримується в холодильнику протягом доби). p align="justify"> Метод заснований на взаємодії між гістаміном і диазотированного n-нітроанілін з утворенням сполуки оранжево-червоного кольору.
Хід визначення. Трихлороцтової екстракт крові фільтрують через паперовий фільтр. В одну пробірку відмірюють 2 мл фільтрату (досвід), в іншу - 0,2 мл стандартного розчину гістаміну і 1,8 мл дистильованої води (стандарт). В обидві проби додають по 3 мл дистильованої води і 1 мл розчину нітриту натрію. Пробірки ретельно струшують і ставлять на 2 хв у киплячу водяну баню. p align="justify"> Потім пробірки охолоджують під струменем водопровідної води і до охолодженим пробам додають по 1 мл диазотированного n-нітроаніліна. Ретельно перемішують проби і доводять їх рН до 10,0 за універсальним індикаторним папером, додаючи спочатку 1,5 мл, а потім 0,5 мл розчину карбонату натрію. Вміст пробірок перемішують, охолоджують під струменем водопровідної води і додають 2-3 краплі розчину гідроксиду натрію до розвитку фарбування. p align="justify"> екстинкція дослідної та стандартної проб вимірюють на ФЕК при 520-540 нм (зелений світлофільтр) в кюветі з товщиною шару 0,5 см проти контролю на реактиви (10 мл дистильованої води, по 2 мл розчинів нітриту натрію і диазотированного n-нітроаніліна, 4 мл розчину карбонату натрію перемішують і доливають 0,6 мл розчину гідроксиду натрію).
Розрахунок проводять за формулою
Еоп200
х = -----,
Їсть
де х - концентрація гістаміну в цільної крові, мкмоль/л;
Еоп - екстинкція досвідченого розчину;
Їсть - екстинкція стандартного розчину;
- концентрація стандартного розчину гістаміну, мкмоль/л.
Оформлення роботи. Розрахувати вміст гістаміну в крові і зробити висновок про можливі причини зміни його рівня. У висновку відобразити практичне значення визначення гістаміну в крові. p align="justify"> Практичне значення роботи. Гістамін відноситься до біогенних амінів. Він грає роль тканинного регулятора і медіатора в нервовій системі. Гістамін посилює проникність стінок кровоносних судин, стимулює функцію залоз шлунка (вироблення соляної кислоти), скоротливу діяльність матки і т.д. Надмірний вміст гістаміну в організмі веде до вегетативним порушень і алергічних реакцій. Визначення гістаміну в практиці використовується для дослідження рівня його в крові і тканинах тварин при дії на них алергенних речовин. Вміст гістаміну в крові має видові коливання. У крові лабораторних тварин (щури, кролі) його концентрація становить 90-220 мкмоль/л, а у здорової людини його міститься 0,02-0,04 мкмоль/л. p align="justify"> В контрольно-аналітичних лабораторіях цей метод застосовується для контролю якості заводських препаратів гістаміну в ампулах, що випускаються у вигляді 0,1%-ного розчину.
ДОСЛІДЖЕННЯ БІОЛОГІЧНИХ РІДИН
Стан біохімічних процесів в тканинах і органах оцінюється прямим і непрямим способом. У першому випадку для цієї мети беруться на дослідження шматочки тканини (біоптати), а в другому, який прийнят...
