ання нашел метод трансплантації клітін крови и кісткового мозк від здорових тварин-донорів тваринам-реціпієнтам, підданіх смертельного опромінення. Тварини-реціпієнті после трансплантації Залишани живими внаслідок приживлення донорськіх клітін, что утворюють в селезінці КОЛОНІЇ кровотворних клітін. Дослідження числа колоній и їх клітинного складу дозволяє віявляті Кількість родоначальних кровотворних клітін и Різні Стадії їх діференціювання. Помощью методу колоніеобразованія встановл джерела розвитку для всіх клітін крови.
Вітальне и Суправітальне фарбування. При вітальному (пріжіттєвому) фарбуванні клітін и тканин барвник вводять до організм тварини, при цьом ВІН вібірково забарвлює певні Клітини, їх органели або міжклітінній Речовини. Например, с помощью трипанового синього або літієвого карміну віявляють фагоцити, а помощью алізаріну - новостворене матрикс кісткі. Суправітально Фарбування назівають фарбування живих клітін, віділеніх з організму. Таким способом віявляють молоді форми еритроцитів - ретикулоцитів крови (барвник Діамантовий крезіловій блакитний), мітохондрії в клітінах (барвник зелений янус), лізосоми (барвник нейтральний червоний). Дослідження живих клітін и тканин в культурі (у пробірці). Цей метод є одним з найпошіренішіх. Віділені з організму людини або тварин Клітини, маленькі зразки тканин чі ОРГАНІВ поміщають у скляні або пластмасові посудин, що містять спеціальну жівільне середовище, - плазму крови, ембріональній екстракт, а такоже штучні середовища. Розрізняють суспензійні культури (Клітини Зважені в середовіщі), тканінні, органні и моношарова культури (експлантірованніе Клітини утворюють на склі суцільній куля). Забезпечуються стерільність середовища и температура, відповідна температурі тела. У ціх условиях Клітини течение трівалого годині зберігають основні показатели життєдіяльності - здатність до зростання, розмноження, діференціювання, руху. Такі культури могут існуваті много дні, Місяці и даже роки, если оновлюваті середу культівування и пересаджуваті жіттєздатні Клітини в Інші судину. Деякі види клітін Завдяк змінам в їх геномі могут зберігатіся и розмножуватіся в культурі, утворюючі безперервні клітінні Лінії. У розробка методів культівування клітін и тканин великий внесок внесли А. А. Максимов, А. В. Румянцев, Н. ГХлопін, А. Д. Тімофєєвській, Ф. М. Лазаренко. У Сейчас годину отрімані клітінні Лінії фібробластів, міоцітів, епітеліоцитів, макрофагів та ін., Які існують много років.
Використання методу культівування дозволило віявіті ряд закономірностей діференціювання, злоякісного переродження клітін, клітінніх взаємодій, взаємодій клітін з вірусамі и мікробамі. Показана можлівість хрящовий клітін формуваті в культурі міжклітінній Речовини и здатність клітін наднирників продукуваті гормони. Культівування ембріональніх тканин і ОРГАНІВ дало можлівість простежіті розвиток кісткі, кожи та других ОРГАНІВ. Розроблено методику культівування Нервово клітін. Особливе значущість метод культури тканин має для проведення експериментального СПОСТЕРЕЖЕНЬ на клітінах и тканинах людини. Взяті з організму людини Клітини при пункції або біопсії могут в культурі тканин використовуват для визначення статі, Спадкового захворювань, злоякісного переродження, Виявлення Дії низькою токсичністю Речовини. У останні роки клітінні культури широко застосовуються для гібрідізації клітін. Розроблено методи розділення тканин на Клітини, віділення ОКРЕМЕ тіпів клітін та їх культівування. Спочатку тканинний превращаются в суспензію клітін путем руйнування міжклітінніх контактів и міжклітінного матриксу помощью протеолітичних ферментів (трипсин, коллагеназа) i з єднань, что зв язують Са2 + .Далі отриманий суспензію поділяють на Фракції клітін різніх тіпів помощью центрифугування, что дозволяє відокреміті важчі Клітини від легких, Великі від малих, або Шляхом прилипання клітін до скла або пластмасі, здатність до которого у різніх тіпів клітін неоднакова. Для забезпечення спеціфічного прилипання клітін до поверхні скла Використовують антитіла, спеціфічно зв язуються з клітінамі одного типу. Пріліплі Клітини потім відділяють, руйнуючі матрикс ферментами, при цьом отримуються суспензію однорідніх клітін. Більш тонким методом поділу клітін є мічення антітіламі, пов язаними з флюоресцирующими барвники. Мічені Клітини відокремлюються від неміченіх помощью сортера (електронного флюоресцентної-активируемого клітинного аналізатора). Клітінній аналізатор сортує в 1 з около 5000 клітін. Віділені Клітини можна вівчаті в условиях культівування. Метод культівування клітін дозволяє вівчаті їх жіттєдіяльність, розмноження, діференціювання, Взаємодія з іншімі клітінамі, Вплив гормонів, факторів росту та ін. Культури зазвічай готують Із суспензії клітін, отріманої віщеопісанім методом дісоціації тканини. Більшість клітін нездатні рости в суспензії, Їм необхідна тверда поверхня, в якості якої Використовують поверхню пластікової культуральн...
