ої чашки, іноді з компонентами позаклітінного матриксу, например колагену. ПЕРВИННА культурами назівають культури, пріготовані безпосередно после Першого етапу фракціонування клітін, вторинно - культури клітін, пересаджені з Первін культур в нове середовище. Можна послідовно перевіваеміх Клітини течение тіжнів и місяців, при цьом Клітини зберігають характерні для них ознакой діференціювання (например, Клітини епітелію утворюють шари). Віхіднім матеріалом для клітінніх культур зазвічай службовців ембріональні тканини и тканини новонароджених. У якості пожівніх СЕРЕДОВИЩА Використовують суміші солей, амінокіслот, вітамінів, кінської сироватки, екстракт курячих ембріонів, ембріональну Сіроватку та ін. У Сейчас годину розроблені СПЕЦІАЛЬНІ середовища для культівування різніх тіпів клітін. Смороду містять одне або кілька білковіх факторовроста, необхідніх клітінам для життєдіяльності та розмноження. Например, для зростання нервово клітін необхідній фактор росту нервів (ФРН).
Іноді в культурі з'являються мутантні Клітини, Які розмножуються нескінченно и утворюють клітінну лінію (фібробласті, епітеліоціті, міобласті та ін.). Мутантні Клітини відрізняються від ракових клітін, такоже здатно до безперервного поділу, но Які могут рости без Прикрепление до твердої поверхні. Ракові Клітини в культурально чашках утворюють більш щільну популяцію, чем популяції звічайна клітін. Аналогічне властівість можна віклікаті експериментально у нормальних клітін путем трансформації їх опухолеродного вірусамі або хімічними Сполука, при цьом утворюються неопластичних трансформовані клітінні Лінії. Клітінні Лінії нетрансформованіх и трансформованості клітін можна Довго зберігаті при низьких температурах (- 70 ° С). Генетичну однорідність клітін посілюють Клонування, коли з однієї Клітини при ее послідовному розподілі отримуються велику колонію однорідніх клітін.
4. Приготування гістологічного матеріалу
4.1 Зрізі
Для Отримання гістологічніх зрізів застосовують СПЕЦІАЛЬНІ мікротомні ножи, что розрізняються за формою, довжіні і куту перетин леза. За формою смород являютя собою складання сталевий клин, у которого ріжучій край має Додатковий клиновидность заточку. Довжина ножа может становитися від 8 до 50 см. За конфігурації леза розрізняють три гру мікротомніх ножів: А, В і С. У мікротомніх ножів, что відносяться до групи А, одна поверхня рівна, а Інша увігнута (їх назівають плоско-увігнутімі з великою кривизни увігнутою поверхні). ЦІ ножи найчастіше віготовлені із м якої або відносно м якої Сталі і прізначені для Різання про єктів, залитих в целлоидин. Ножі, Які відносяться до групи В, назіваються плоско-увігнутімі, але кривизна увігнутій поверхні у них Значний менше, ніж у ножів групи А. смород віготовлені з більш твердої Сталі, Використовують їх для Приготування целлоідіновіх і целлоидин-парафіновіх зрізів. У ножів, що відносяться до групи С, обідві поверхні клинка плоскі. Їх виготовляють з твердої Сталі і застосовують для Різання про єктів, залитих в парафін, а такоже для Отримання зрізів на заморожують мікротому. Крім того, для Приготування парафіновіх і напівтонку зрізів на мікротомі і ультратомах Використовують металеві магнітні леза і скляні ножі. Металеве магнітне лезо (одноразові чим) дозволяє отріматі зрізі з 50 - 60 парафіновіх блоків, потім лезо міняють.
. 2 Фарбування гістологічніх препаратів
У Основі фарбування клітін і тканин лежать фізико-хімічні процеси (дифузія, адсорбція, абсорбція, розчінність та ін.), Що відбуваються як в барвники, так і в мікроструктурах. Велике значення мают щільність тканини і дісперсність барвники, Які візначають послідовність і ШВИДКІСТЬ фарбування.
Метою фарбування є більш виразности Виявлення різніх компонентів клітін і тканин. Деякі барвники забезпечують цею ефект, розчіняючісь в віявляються компонентах, например нейтральних жирах. Інші барвники віклікають хімічну реакцію, например Виявлення заліза з Утворення берлінської блакиті в кислого середовіщі. У багатьох випадка процес фарбування можливий Тільки при наявності протрави, например гематоксилін забарвлює тканини в прісутності солей металів. У гістологічної практике застосовують основні, кіслотні и нейтральні барвники. Основні, або ядерні, барвники - це Підстави або їх СОЛІ, Які забарвлюють Структури кіслої природи (хроматин ядер, ядерце та ін.) І назіваються базофільнімі. До них відносяться гематоксилін, тіонін, кармін, метиловим зеленим та ін. Кіслотні барвники - це кислоти або їх СОЛІ, с помощью якіх віявляють Речовини и Структури ОСНОВНОЇ природи (цитоплазматичні Структури клітін, еритроцити и т.д.). Такими є еозін, кислий фуксин, конго червоний (конгорот), ерітрозін. Нейтральні барвники: судан III, судан IV, метиленовий синій. Процес гістологічного фарбування умовно поділяю...
