1:00 при 38 ° С.
Після рестрикції утворюється фрагмент, довжиною близько 400 п.н.
Молекулярно-генетична ідентифікація ліній м'якої пшениці з колекції КНИИСХ, стійких до листової іржі
Ген Lr39 (Lr41) переданий в м'яку пшеницю від Ae. Tauschii Coss. (= Ae. Squarrosa L., Triticum tauschii (Coss.) Schmal.). Джерелом цього гена є кілька зразків Ae. Tauschii різного географічного походження. З використанням одного з них була отримана лінія пшениці KS86WGRC02. Ген Lr39 у цієї лінії картирован в короткому плечі хромосоми 2D і зчеплений з SSR-маркером Xgwm210 [Raupp et al., 2001; Singth et al., 2004].
Другим джерелом цього гена є лінія пшениці KS90WGRC10, що отримала ген стійкості від іншого зразка Ae. Tauschii. Спочатку передбачалося, що ця лінія несе ген, відмінний від Lr39 і локалізований в хромосомі 1D [Cox et al., 1994]. Нового гену був привласнений символ Lr41. Проте надалі з використанням гибридологического аналізу і молекулярних маркерів S. Singh з співавторами (2004) показали, що лінії KS86WGRC02 і KS90WGRC10 мають один і той же ген.
У колекції Lr-ліній ВІЗР є обидва зразка з геном Lr39. У результаті щорічної польової і лабораторної оцінки лінія KS90WGRC10 характеризувалася як високо стійка [Гультяева, 2012].
У лабораторії КНИИСХ нами за допомогою спеціальних цитологічних методів була отримана геномної-додана форма T. migushovae, що містить в собі генетичний матеріал Ae. tauschii і T. timopheevi, на основі якої були створені інтрогрессівние лінії м'якої пшениці.
За результатами ПЛР-аналізу в лабораторії біотехнології КНИИСХ маркер гена Lr39 був ідентифікований у високо-стійких до листової іржі лініях +1731 і 1 755.
Малюнок 3 - Електрофорез. М - маркер довжини, 1 - Tr. Migushovae, 2-24 - лінії.
Ген Lr50 перенесений в м'яку пшеницю від Triticum Timopheevii subsp. armeniacum і локалізована в довгому плечі хромосоми 2В. Джерелом цього гена є кілька зразків дикого виду, з використанням яких створені беккросная лінії на основі трьох сортів озимої м'якої пшениці [Brown-Guedira et al., 2003]. У зв'язку з цим кілька ліній з геном Lr50 (U2657 (Karl92 * 3/TA874), KS96WGRC36 (TAM 107 * 4/TA 870) і U3193 (TAM 107 * 4/TA874) рекомендовані для селекції як донорів і використовуються при аналізі вірулентності P. triticina. Ген описаний як частково ефективний в Північній Америці і Росії [Brown-Guedira, Singh; Гультяева та ін., 2 009].
В умовах лабораторії відділу біотехнології КНИИСХ передача гена Lr50 в інтрогрессівние лінії здійснювалася за допомогою геномних-доданої форми T. migushovae.
У літературі описано дві мікросателітних маркера гена Lr50. У ході роботи нами був використаний маркер Xgdm87.
За результатами ПЛР-аналізу в лабораторії біотехнології КНИИСХ маркер гена Lr 50 був виявлений в лініях 449, 569, 763, 828, 899, 1417, 1731, 1741, 1897, 643.
Ген Lr9 переданий м'якій пшениці від Aegilops umbellulata Zhuk. і локалізована в довгому плечі хромосоми 6B [Sears, 1961]. Перші сорти з Lr9 створені в 60-70-х роках минулого століття в США. Ген Lr9 масово включали в селекційні програми в багатьох країнах, у тому числі і в Росії. Цей ген найбільш часто зустрічається в ярих сортах, вирощуваних у Поволжі, на Уралі і Західному Сибіру. Серед сортів, включених до Державного реєстру селекційних досягнень і рекомендованих до обробітку в РФ, частка носіїв Lr9 становить 9% [Гультяева, 2012].
Малюнок 4 - Електрофорез. М - маркер довжини, 1 - Tr. Migushovae, 2-24 - лінії.
Донедавна ген Lr9 ставився до групи високоефективних у всьому світі. Вирощування сортів з ним зумовило появу вірулентних ізолятів гриба, які вперше були відзначені в США в 1971 р через чотири роки з початку масового обробітку [McIntosh et al., 1995]. В даний час вірулентність до гену Lr9 відзначається як в регіонах вирощування сортів з цим геном, так і за їх межами. У Росії ген Lr9 втратив ефективність в Західному Сибіру [Мєшкова та ін., 1998]. У сучасній селекції ген Lr9 рекомендується використовувати в поєднанні з іншими високоефективними Lr-генами, наприклад, Lr24 [Gupta etl al., 2010].
Виходячи зі своїх родоводів, можна зробити висновок про те, що отримані нами в лабораторії біотехнології КНИИСХ інтрогрессівние лінії можуть містити відомі гени стійкості до листової іржі Lr9 від Ae. umbellulata.
На сьогоднішній день ген Lr9 є єдиним відомим геном стійкості до листової іржі, переданим в м'яку пшеницю від Ae. umbellulata. Даний ген є високоефективним в деяких країнах Європи, в тому числі і в Росії [Zhemchuzina, Kurkova, 2010]. Молекулярний маркер, зчепл...
