их тест-систем для ідентифікації клінічно значущих мутантних штамів HBV, а також використанню нових оптичних приладів (біосенсорів) для комплексної діагностики інфекції HBV (вірусних білків , антитіл до них і ДНК HBV)
Серодиагностика гепатиту С
Вірус гепатиту С (hepatitis C virus, HCV) є РНК містить гепатотропним і лімфотропним вірусом, що належать до сімейства Flaviviridae. Геном вірусу представлений одноланцюжкові молекулою (+) РНК розміром близько 9500 підстав, що кодує структурні і неструктурні белкі.К структурним білок відносять білок серцевини (кор) і глікопротеїни оболонки (Е1 і Е2). Неструктурної область представляє комплекс білків з ферментативною активністю, в першу чергу РНК-залежна - РНК полімераза. Крім вірусних білків, зовні віріон покритий ліпідної оболонкою складається з ліпопротеїнів організму господаря низької щільності. До 1990 р ХГ ні-А-ні-В з парентеральним шляхом передачі діагностували на підставі підвищеної активності АЛТ сироватки протягом 6 місяців, за відсутності інших відомих маркерів вірусних гепатитів. Однак у частини хворих ХГ С рівень АЛТ не підвищується. У сучасній діагностиці гепатиту С основна роль відводиться визначенню антитіл до HCV і виявленню РНК HCV.
На відміну від гепатиту В, при якому можуть бути визначені антигени вірусу і антитіла до них, при гепатиті С методом ІФА уловлюються тільки антитіла. Антигени HCV, якщо і потрапляють в кров, то в кількостях, які практично не уловлюються. Вони можуть бути виявлені тільки в тканини печінки при використанні іммунногістохіміческіх методів дослідження. Це істотно обмежує можливість оцінки перебігу та активності інфекційного процесу.
Анти-HCV не свідчать про триваючої реплікації вірусу, і можуть бути ознакою як поточної, так і перенесеної інфекції. Доводиться також враховувати, що у реципієнтів, яким була перелита інфікована кров, можуть виявлятися анти-HCV донора, не обов'язково свідчать про зараження HCV. У хворих ХГ С анти-HCV виявляються в крові не тільки у вільній формі, але й у складі циркулюючих імунних комплексів. Антитіла утворюються до кожного з вірусних білків, розташованих у структурній і неструктурной області вірусного генома. Цим визначається їх різна специфічність і, відповідно, різна діагностична інформативність. Для скринінгу гепатиту С використовують метод ІФА, а в якості підтверджуючого тесту - метод іммунноблота (RIBA). Існує кілька поколінь діагностичних тест-систем для виявлення анти-HCV, що відрізняються своєю чутливістю і специфічністю (таблиця 2).
Таблиця 2. Порівняння різних поколінь діагностичних імуноферментних тест-систем для виявлення антитіл до ВГС.
Тест-сістемаШіфр фрагментовБелок, що містить даний фрагмент Еффектівность1 поколеніеС100-3NS3 і NS4до 82,2% 2 поколеніеС100-3, С22, С33сNS4, кор, NS3до 97,5% 3 поколеніеС100-3, С22, С33с , NS5NS4, кор, NS3, NS5до 99,7% 4 покоління * С100-3, С22, С33с, NS5NS4, кор, NS3, NS5до 99,7% RIBA - 3С100-3, С22, С33с, NS5, e1, e2NS4, кор, NS3, NS5, E1, E2до 99,6% * Тест-системи 4-го покоління містять синтетичні і рекомбінантні вірусні антигени, розміри яких можуть відрізнятися від фрагментів 3-го покоління.
У висновку слід згадати про необхідність комплексного обстеження хворого із залученням новітніх досягнень медичної та біологічної науки для правильної діагностики вірусних гепатитів та призначення адекватної терапії хворому. [2,4,7,21]
Біохімічний аналіз крові
Біохімічний аналіз крові пацієнтів давно увійшов в практику клінічних лабораторій. Сукупність отримуваних даних про показники обміну биллирубина, сироваткових білках і ферментах дозволяють виявити запальні процеси, що відбуваються в організмі людини і припустити їх локалізацію. Ці критерії не специфічні і не характеризують етіологію вірусних гепатитів, разом з тим істотні для оцінки функціонального стану печінки.
Показники обміну білірубіну.
Оцінити у пацієнта стан обміну білірубіну можна на підставі біохімічного аналізу крові, сечі і калу. Вільний білірубін є похідною гемоглобіну, що вивільняється в процесі гемолізу еритроцитів. У фізіологічних умовах кожну добу гемолизируются приблизно 1% циркулюючих еритроцитів, з яких утворюється 200-250 мг білірубіну. Основна частина білірубіну надходить у кров'яне русло з клітин системи мононуклеарних фагоцитів селезінки і кісткового мозку. Білірубін розчиняється у воді, тому в крові його перенесення здійснюють неспецифічні транспортні білки - альбуміни. Вільний білірубін є токсичною сполукою, здатним проникати через гематоенцефалічний бар'єр, викликаючи енцефалопатії. Детоксикація білірубіну відбувається в клітинах печінки, де до нього приєднується глюкуроновая кислота, утворюючи глюкуроніди білірубіну. Ці сполуки вже не токсичні і водорозчинні, що...