иконуються поза ПЛР-лабораторій, однак помилки, що допускаються на цьому етапі, надають чи не найістотніший вплив на результат дослідження. Більшість цих помилок неможливо виявити в ході дослідження, і, отже, істотно зростає ризик отримання помилкового результату. У зв'язку з цим необхідна спільна робота з різними підрозділами ЛПУ по розробці алгоритму взяття біоматеріалу та контроль його виконання.
Взяття біологічного матеріалу. p> Першою і істотною помилкою преаналітичного етапу ПЛР-діагностики є неправильний вибір місця взяття біологічного матеріалу для дослідження. Оскільки метод ПЛР є прямим, тобто дозволяє безпосередньо виявити причину захворювання, а даному випадку виявити патогенний мікроорганізм, то біоматеріал необхідно брати безпосередньо в місці передбачуваної локалізації інфекційного процесу. Дослідження якогось "універсального матеріалу", як, наприклад, крові, не дозволить визначити наявність в організмі патогена у всіх випадках, за винятком тих, при яких збудник локалізована саме в крові. У першу чергу це відноситься до патогенів, які можуть вражати багато органів і тканини, таким як, наприклад, Chlamydia trachomatis або Мусоbасterium tuberculosis.
Chlamydia trachomatis можуть вражати епітелій слизової оболонки урогенітального тракту, епітелій кон'юнктиви очі і синовіальної порожнини. Отже, при підозрі на урогенітальний хламідіоз матеріалом для дослідження повинен служити зішкріб з урогенітального тракту, при ураженні очей у новонародженого - зішкріб з кон'юнктиви ока, при хламидийном артриті - пунктат синовіальної рідини.
Мусоbасterium tuberculosis можуть вражати практично будь-який орган і тканина організму людини, тобто матеріал для дослідження не повинен бути одним і тим же при різних формах патологічного процесу.
Таким чином, якщо у дитини хламідіоз очей, а для дослідження взято зразок з урогенітального тракту, а при туберкульозі нирок для дослідження береться мокрота, негативний результат не буде виключати факту інфікування пацієнта.
Друга помилка на преаналітичному етапі - неправильне взяття матеріалу на дослідження.
Загальними вимогами до біологічного матеріалу є максимальна концентрація мікроорганізмів у зразку, а також відсутність небажаних домішок, інгібуючих ПЛР.
Наприклад, Chlamydia trachomatis - облігатні внутрішньоклітинні паразити, отже, досліджуваний матеріал повинен містити велика кількість клітин епітелію. Тобто при взятті матеріалу для виявлення цих мікроорганізмів необхідно робити зішкріб, а не мазок, оскільки в мазку Chlamydia trachomatis не будуть виявлені, навіть якщо знаходяться в організмі в значній кількості.
При взяття матеріалу з урогенітального тракту необхідно уникати інгібуючих домішок, таких як слиз, кров або гній. Для цього зскрібки беруть не раніше, ніж через дві години після сечовипускання, у жінок враховують дні циклу. Надлишок слизу або гною необхідно видалити стерильним ватним тампоном безпосередньо пер...
