ед взяттям біоматеріалу. Забирати матеріал бажано спеціальними пластиковими зондами, що знижує ймовірність появи крові у зразку, до того ж вони, на відміну від ватних, що не сорбували транспортну середовище і досліджуваний матеріал. p> Обробка біологічного матеріалу.
Правильне взяття урогенітального зскрібка - процедура болюча для осіб чоловічої статі і дітей, тому для дослідження можна використовувати першу порцію ранкової сечі, що містить максимальну кількість епітелію. У подальшому для роботи необхідно отримати клітинний осад сечі. Однак слід враховувати, що осад містить велику кількість солей і сечовини, які при використанні технологій флуоресцентної детекції денатурують зонди, що може призвести до хибнопозитивних результатів. Тому клітинний осад сечі необхідно в обов'язковому порядку промивати фізіологічним розчином.
Наступна помилка преаналітичного етапи - неправильна обробка взятої крові. Для запобігання згортання крові в процесі доставки необхідно використовувати антикоагулянти. У багатьох лабораторіях як антикоагулянту використовується гепарин. Однак гепарин досить сильно інгібує ПЛР, і незалежно від використовуваної тест-системи та способу пробопідготовки всі результати для зразка, його містить, виявляться недостовірними у разі наявності внутрішнього контролю ПЛР або негативними, незалежно від реального стану речей у разі, якщо внутрішнього контролю немає . p> Зберігання біологічного матеріалу.
Необхідно пам'ятати про температуру зберігання біологічного матеріалу, а також терміни та способи його доставки в ПЛР-лабораторію у разі, якщо транспортування вимагає значного часу. При порушенні строків зберігання або транспортування біоматеріалу ДНК або РНК збудника може руйнуватися, що призведе до хибнонегативних результатами. Зразки рекомендується зберігати при температурі від 2 до 8 В° С протягом декількох годин, для більш тривалого зберігання необхідно заморожування. Єдине виняток - кров, оскільки цільну кров заморожувати не можна! Необхідно отримати плазму і вже її заморожувати. Замороження повинна бути одноразовою, у Інакше відбувається руйнування нуклеїнових кислот.
2.Ошібкі аналітичного етапу ПЛР-діагностики
Помилки в роботі. p> Помилки аналітичного етапу, як правило, пов'язані з неуважним читанням інструкції, що додається до набору для проведення ПЛР-аналізу. p> Однією з таких помилок є неправильний вибір системи пробопідготовки. Менш небезпечно застосування експрес-методів котрі три складних біоматеріалів - таких як, наприклад, плазма крові, тому що в цьому випадку найбільш ймовірно отримання недостовірних результатів через що залишилися в пробі інгібіторів ПЛР, що, у свою чергу, змусить фахівця КДЛ повторити експеримент і з'ясувати причину невдачі. Набагато небезпечніше, якщо через неправильно обраної тест-системи в процесі пробопідготовки втрачається частина або вся ДНК або РНК збудника - в цьому випадку є ризик отримання хибнонегати...
