ція - процес поглинання клітиною організму вільної молекули ДНК з середовища і вбудовування її в геном, що призводить до появи у такої клітини нових для неї успадкованих ознак, характерних для організму-донора ДНК. Іноді під трансформацією розуміють будь-які процеси горизонтального переносу генів, в тому числі трансдукцію, кон'югацію і т. д.
Трансформація прокаріот
У будь-якій популяції лише частина бактерій здатна до поглинання з середовища молекул ДНК. Стан клітин, при якому це можливо, називають станом компетентності. Зазвичай максимальне число компетентних клітин спостерігається в кінці фази логарифмічного росту. p align="justify"> У стані компетентності бактерії виробляють особливий низькомолекулярний білок (фактор компетентності), що активізує синтез аутолізіна, ендонуклеази I і ДНК-зв'язуючого білка. Аутолізін частково руйнує клітинну стінку, що дозволяє ДНК пройти через неї, а також знижує стійкість бактерій до осмотичного шоку. У стані компетентності також знижується загальна інтенсивність метаболізму. Можливо штучне приведення клітин в стан компетентності. Для цього застосовують середовища з високим вмістом іонів кальцію, цезію, рубідію, Електропорація або замінюють клітини реципієнта протопластами без клітинних стінок. p align="justify"> Ефективність трансформації визначається кількістю колоній, що виросли на чашці Петрі після додавання до клітин 1 мкг суперскрученості плазмідної ДНК і розсіву клітин на живильне середовище. Сучасні методи дозволяють домагатися ефективності 106-109. p align="justify"> Поглинається ДНК повинна бути двухнитевой (ефективність трансформації однонитевой ДНК на порядки нижче, однак дещо зростає в кислому середовищі), її довжина - не менше 450 пар основ. Оптимальне pH для проходження процесу - близько 7. Для деяких бактерій (Neisseria gonorrhoeae, Hemophilus) поглинається ДНК повинна містити певні послідовності. p align="justify"> ДНК необоротно адсорбуються на ДНК-зв'язуючого білка, після чого одна з ниток розрізається ендонуклеазою на фрагменти довжиною 2-4 тис. пар основ і проникає в клітину, друга повністю руйнується. У разі, якщо ці фрагменти мають високий ступінь гомології з якими-небудь ділянками бактеріальної хромосоми, можлива заміна цих ділянок на них. Тому ефективність трансформації залежить від еволюційного відстані між донором і реципієнтом. Загальний час процесу не перевищує декількох хвилин. Згодом, при діленні, в одну дочірню клітину потрапляє ДНК, побудована на основі вихідної нитки ДНК, в іншу - на основі нитки з включеним чужорідним фрагментом (вищепленію)
Трансформація еукаріотичних клітин з використанням синтетичних полімерних катіонів
Доставка чужорідних нуклеїнових кислот всередину інтактних клітин, або трансформація, лежить в основі багатьох методів генної інженерії. Транспортування функціональних генів у тканини може зробити можливою корекцію генної недостатнос...
