ті і мутацій, наслідком яких є важкі спадкові патології або ракові пухлини. В даний час розроблено цілий ряд прийомів для введення ДНК в клітини, серед яких найбільш поширені преципитация фосфатом кальцію або діетіламіноетіл-декстраном (ДЕАЕ-декстраном), електропорація, мікроін'єкція, вбудовування ДНК в реконструйовану оболонку вірусів або ліпосоми (штучні мембранні ліпідні везикули).
Незважаючи на різноманітність цих методів, пошук нових шляхів трансформації про-і еукаріотів триває. З одного боку, це викликано необхідністю підвищення ефективності трансформації, з іншого - перераховані вище методи застосовні лише для обмеженого числа клітинних ліній і неефективні при спробах введення в клітини РНК. Нарешті, більшість цих підходів не може бути використано для генетичної трансформації in vivo. p align="justify"> В якості переносників ДНК використовуються ретровірусних вектори, вектори на основі ДНК-вірусів і ВІЛ, ліпосоми на основі катіонних ліпідів, полімерні ДНК-зв'язуючі катіони. Використання синтетичних полімерів в якості переносників ДНК має ряд переваг: зручність зберігання та очищення, простота тестування токсичності та безпеки і, що особливо важливо для генної терапії, зниження ризику патогенетичних та імунологічних ускладнень. p align="justify"> При змішуванні розчинів лінійних полікатіон і ДНК формуються інтерполіелектролітние комплекси (ІПЕК) за рахунок утворення кооперативної системи межцепних електростатичних зв'язків. При цьому полікатіон ланцюга оточують молекулу ДНК, утворюючи сфери або тороіди, залежно від типу полімеру. Включення до ІПЕК призводить до компактизації ДНК, підвищенню її стійкості до дії нуклеаз, сприяє посиленню її взаємодії з клітинної мембраною і підвищенню трансформирующей активності по відношенню як до прокаріотів, так і еукаріотичних клітинам. Поєднуючи молекули полікатіона з лігандами, здатними до специфічного зв'язування з клітинною мембраною, можна забезпечити проникнення ІПЕК в клітку по рецепторному шляху, а в організмі - адресну доставку до клітин-мішеней. p align="justify"> Системи доставки ДНК для застосування в генній терапії повинні забезпечувати проникнення ДНК в потрібний орган, тканина, або в конкретну групу клітин, а потім - у клітинне ядро. Антисмислового олігонуклеотиди, а саме вони найчастіше використовуються в генній терапії, повинні знайти ту мРНК або ділянка хромосомної ДНК, проти якої вони спрямовані. Введений ген повинен увійти до складу конструкц ии, здатної його експресувати.
Однак це досить складна проблема. При введенні нуклеїнової кислоти або олігонуклеотиду в організм вони не потраплять переважно до потрібної тканини або потрібного органу, а та їх частина, яка виявиться в потрібному місці, лише в незначній мірі зможе пройти крізь гідрофобну клітинну мембрану. Крім того, в ході еволюції були вироблені механізми захисту клітин організму від вторгнення факторів зовнішнього середовища, в тому числі і чужорідної ...
