ої (ТШХ) хроматографії, що дозволяє швидко встановлювати однорідність досліджуваних речовин і виявляти навіть незначні їх кількості. Для ТШХ найбільш часто застосовуються пластинки Силуфол або Сорбфіл, іноді використовується оксид алюмінію II ступеня активності, силікагель, а в якості систем розчинників - суміші бензолу і ацетону (1:2), бензолу, метанолу і ацетону (8:2:10), гексану і хлороформу, толуолу і н-бутанолу (гідрокси-і метоксікумаріни), спирту етилового та хлороформу (5,5:4,5), хлороформу і формамід (скополетин), етилацетату і бензолу (1:2), діетилового і петролейного ефіру (фурокумаріни) та інші.
Найкращим сорбентом для розділення суми кумаринів методом ТШХ вважається оксид алюмінію, при цьому в якості елюентів використовують суміші: петролейний ефір - етилацетат (2:1), петролейний ефір - хлороформ, циклогексан - етилацетат (3:1), бензол - етилацетат у різних співвідношеннях і бензол.
У паперової хроматографії використовуються різні марки паперу. Слід зазначити, що зважаючи виборчої розчинності кумаринів у водних і неполярних розчинниках, застосовується метод импрегнирования хроматографічного паперу 20% водними розчинами етиленгліколю або пропіленгліколю, розчином формамід (або диметилформаміду) у метанолі або ацетоні, розчинами бората або фосфату натрію. У першому випадку гидроксилсодержащие кумарини залишаються на лінії старту, тому використовується просочування паперу іншими розчинами або проводиться хроматографування в системі БУВ без импрегнирования паперу.
Детекція кумаринів на хроматограмах найчастіше проводиться по флуоресценції в УФ-світлі при характерних довжинах хвиль до і після обробки хроматограми водно-спиртовими розчинами гідроксиду калію, парами аміаку, а також з інших кольоровим реакцій. Колір флуоресценції не дозволяє з достатнім ступенем точності визначити структуру кумаринів, але в ряді випадків по ньому можна судити про наявність та зразковому розташуванні функціональних угруповань.
Індивідуальні речовини виділяють з використанням препаративної ТШХ. Ідентичність виділеного речовини встановлюють за такими характеристиками, як температура плавлення, ІЧ-, ЯМР-та мас-спектри. ІЧ-спектри кумаринів мають характерні смуги поглинання при 1750-1700 см -1 (-С = О групи) і при 1620 - 1470 см -1 (Для-С = С-ароматичного кільця). При дослідженні кристалічної структури синтетичних речовин даного класу можливе використання кристалографічного аналізу із застосуванням програмного забезпечення SHELXL97. В якості характеристики кумаринів з бічним ланцюгом, що містить асиметричні атоми вуглецю, хіральних атомів вуглецю фуранового циклу заміщеного дігідроангеліціна і піранового циклу заміщеного келлактона може використовуватися величина питомого обертання.
Для підтвердження структури виділених з рослин кумаринів можливе використання зустрічного синтезу. Серед методів синтезу слід зазначити конденсацію Перкина (З саліцилового альдегіду і оцтового ангідриду), ре...