Зміст
1. Іммобілізовані ферменти. Методи іммобілізації
2. Застосування іммобілізованих ферментів
Література
В
1. Іммобілізовані ферменти. Методи іммобілізації
ІММОБІЛІЗОВАНИХ ФЕРМЕНТИ (від лат. immobiiis - нерухомий), препарати ферментів, молекули яких брало пов'язані з матрицею, або носієм (як правило, полімером), зберігаючи при цьому повністю або частково свої каталитич. св-ва. Іммобілізовані ферменти зазвичай не розчин. у воді; між двома фазами можливий обмін молекулами субстрату, продуктів каталитич. р-ції, інгібіторів і активаторів.
Комерційне використання ферментів обмежено рядом факторів. Найважливіші з них - нестабільність ферментів та їх висока вартість. Вартість можна істотно знизити за рахунок іммобілізації ферменту. Це означає, що фермент закріплюють на поверхні або всередині твердої підкладки, яку легко видаляють з реакційної суміші після завершення ферментації. Фермент може бути використаний повторно, що істотно знижує вартість процесу. p> Інша перевага іммобілізації полягає в тому, що фермент стає більш стабільним, ймовірно, за рахунок обмеження його здатності денатурувати при змінах рН, температури і розчинників. Наприклад, іммобілізована глюкозоізомераза стабільна при 65 В° С протягом року, тоді як в розчині вона денатурує при 45 В° С за кілька годин. p> ІММОБІЛІЗОВАНИХ фермент можна використовувати для безперервного (відкритого) виробництва, пропускаючи реагенти через фермент і збираючи продукт на кінцевому етапі. p> Методи іммобілізації ферментів
Існують різні способи іммобілізації ферментів. Вони включають або механічне включення (Захоплення) ферменту, або його приєднання до певної структури, або матриці. Перевагою методу захоплення є те, що фермент зберігається в природному стані. Однак великим молекулам важко дістатися до ферменту. p> Фізична іммобілізація ферментів представляє собою включення ферменту в таке середовище, в якій для нього доступною є лише обмежена частина загального обсягу. При фізичній іммобілізації фермент не пов'язаний з носієм ковалентними зв'язками. Існує чотири типи зв'язування ферментів:
- адсорбція на нерозчинних носіях;
- включення в пори гелю;
- просторове відділення ферменту від решти обсягу реакційної системи за допомогою напівпроникною перегородки (мембрани);
- включення до двофазну середу, де фермент розчинний і може знаходитися тільки в одній з фаз. p> Для іммобілізації ферментів в гелі існує два основних способи. При одному з них фермент поміщають у водний розчин мономера, а потім проводять полімеризацію, в результаті чого утворюється полімерний гель з включеними до нього молекулами ферменту. У реакційну суміш часто додають також біфункціональні (Містять в молекулі два подвійні зв'язки) сшивающие агенти, які надають утворюється полімеру структуру тривимірної сітки. В іншому випадку фермент вносять в розчи...
