мунохімічних методів визначили, чи реагує вона з препаратами гемоглобінів (комерційних, випускаються хімічними фірмами) з різних джерел. При іммуноферментном аналізі в розчині (ELISA) було виявлено, що антисироватки чітко "дізнається" гемоглобін індика, а за допомогою іммуноблоттінга (це на спеціальній мембрані) отримані ще більш вичерпні дані.
У [8] пророблені всі стандартні контролі і представлений майже весь первинний експериментальний ілюстративний матеріал. Перед імуноблотинг автори переконалися, що наявні у них стандартні препарати гемоглобінів кролика, індика і змії цілком якісні. Дійсно, хоча і закуплені, напевно, на великих хімічних фірмах (у статті не вказано, але навряд чи самі очищали), такі препарати можуть псуватися при зберіганні навіть у холодильнику (мікроби з'їдять, вода потрапить). Це вам не доводити, що виділеним не розпався фрагментами білка тиранозавра мільйони років. Спробуй не переконайся, що твої стандартні препарати сучасних білків не розвалилися у тебе (частково, звичайно) при зберіганні протягом декількох років, або ж при неакуратної транспортуванні з фірми (коли лід покласти забули), і колеги-біохіміки можуть вказати на можливість некоректності і артефактів, подивившись отримані тобою дані.
Це тільки у тиранозавра його поліпептиди десятки мільйонів років нераспадающіхся здатні.
Як би там не було, перед імуноблотинг автори провели електрофорез своїх стандартних гемоглобінів (Електрофореграма представлена) і переконалися, що всі вони мають притаманну гемоглобіну молекулярну масу (порядку 64.000), тобто, що препарати "не розвалилися".
Після цього проводили їх імуноблотинг з антисироваткою до білкового екстракту з кістки тиранозавра і виявили виразну (у всякому разі, на фото) реакцію з гемоглобінами кролика і індика. А от з гемоглобіном змії антитіла не реагували, і це послужило контролем того, що антитіла зв'язуються ні з будь-яким білком. Якби антитіла "дізналися" ще і гемоглобін змії, то авторам довелося б для контролю дослідити реакцію з ще яким-небудь білком, НЕ гемоглобіном (з альбуміном, наприклад). Щоб сказати: так, реакція характерна не просто для білків як таких, а саме і тільки для гемоглобінів.
Але в молекулі гемоглобіну змії не виявилося тієї ділянки амінокислотної послідовності, який відповідав фрагментами гемоглобіну тиранозавра, в той час як в гемоглобін індика і кролика він був. Антитіла не зреагували з гемоглобіном змії, і, тому, авторам пощастило: не довелося проводити додаткове дослідження реакції з яким-небудь іншим, неспецифічним білком. У якості його випадково виступив гемоглобін змії. p> З першого погляду здається дивним: антитіла до білку тиранозавра, а реагують з гемоглобіном кролика, але не змії. Але це й не важливо: просто таку ділянку поліпептидного послідовності у фрагментах вельми розпався гемоглобіну тиранозавра попався, якого немає в білку змії. Тим більше, що він є в гемоглобіні птиці (індика), а саме до птахів ящери типу ти...
