ого Подвійного мутанта БУВ у 1,25 рази вищий, чем у стрептоміцін резистентного штаму КО600. Наступний етапом роботи Було сконструюваті Потрійний мутант, стійкій одночасно до трьох антібіотіків: стрептоміціну, гентаміцину и рифампіцину. На Основі мутанта КО605 Було сконструйовано такий Потрійний мутант - КО606. Проаналізувавші его рівень антібіотічної актівності Було показано, что цею мутант сінтезує антібіотіка в 1,26 рази больше, чем подвійний мутант КО605 [16].
Такоже Цікаві результати були Отримані при проведенні робіт з метою Підвищення антібіотічної актівності штам?? S. coelicolor А (3) 2, при вікорістанні такого ж комбінування мутацій стійкості до різніх антібіотіків. При вікорістанні спонтанного мутагенезу, отрімувалі мутанти, стійкі до стрептоміціну, рифампіцину та гентаміцину. Рівень синтезу актінородіну такими мутантами БУВ у 1,6 - 3 рази вищий від віхідного штамів. Наступний етапом цієї роботи Було сконструюваті подвійні мутанти, введенням rifr або genr-мутацій в strr-мутант. Це призводило до Збільшення уровня Утворення антібіотіка у 1,7 - 2,5 разів в порівнянні з одиночними мутаціямі стійкості до антібіотіків. При конструюванні потрійніх мутантів (strr rifr genr), Було виявлено, что продукція актінородіну зросла у 48 разів у порівнянні з віхіднім штамів [10, 14].
Отже, для Отримання вісокоактівніх штамів - продуцентів антібіотіків, звітність, вивчити та вміло використовуват метод направленого індукованого мутагенезу, для Зміни структурованих та експресії генів біосінтезу антібіотіків та Первін метаболітів. Такоже ВАЖЛИВО моментом для Отримання мутантів з скроню антібіотічною актівністю є Вивчення генів, Які контролюють стійкість до власного та других антібіотіків, а такоже механізму їх Дії.
Таким чином, Використання селекційніх підходів та СУЧАСНИХ генно-інженерних маніпуляцій є ВАЖЛИВО моментом у конструюванні штамів - продуцентів протипухлинного антібіотіків. А висока ВАРТІСТЬ ціх препаратів, зумовлена ??порівняно низька антібіотічною актівністю штамів-продуцентів та їх здатністю сінтезуваті складні Суміші кінцевіх ПРОДУКТІВ, з якіх позбав один або два мают терапевтично Цінність, надає всі більшої актальності поиска надпродуцентів ціх антібіотіків [2, 3].
2. МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕНЬ
.1 Про єкт ДОСЛІДЖЕНЬ
В работе БУВ використаних актіноміцетній штам S. sioyaensis Lv81, а такоже Sarcina lutea як тест-культура для визначення антібіотічної актівності.
.2 СЕРЕДОВИЩА для культівування
. Соєве середовище № 14 (СС - 14)
соєва крупа 10,0 г2, 5 г
агар 7,5 г
вода водопровідна до 0,5 Л7, 2
Стерілізація при 0,7 - 0,9 атм - 45 хв
. Вівсяне середовище
Вівсяна крупа 32,0 г
агар 12,0 г
вода водопровідна до 0,5 Л7, 2
Стерілізація при 0,7 - 0,9 атм - 45 хв.
. Тріптозній агар
агар 10 г
триптон 5 г
дріжджовій екстракт 5 г5 г
глюкоза 1 г
вода водопровідна до 1 Л7, 8
Стеріліз...
