Технологія типування ДНК постійно рухається вперед. Схематично технологію такого дослідження в загальних рисах можна представити відповідно такими етапами:
Виділення молекул ДНК з досліджуваного матеріалу. (Молекули ДНК знаходяться в ядрах клітин в структурі ДНК.)
фраґментованість (поділ на фрагменти) молекул ДНК за допомогою ферментів - рестриктаз. Існує безліч видів рестриктаз, які розрізають молекулу ДНК в місцях, властивих тільки їм, тобто кожен вид рестріктази тільки в тому місці, в якому йому належить бути його хімічною природою.
Суміш фрагментів ДНК поділяють методом електрофорезу в гелі. Метод грунтується на тому, що під впливом електричного струму фрагменти ДНК пересуваються в спеціальному середовищі - гелі.
З усього набору фрагментів, розташованих на різних ділянках електрофоретичної пластинки, за допомогою спеціальних зондів виявляють поліморфні фрагменти.
Доцільно виробляти паралельне дослідження відомого за походженням об'єкта (від А) та невідомого (від X). Отримані картинки розподілу ГВ-фрагментів порівнюють між собою з використанням методів математичного аналізу. Розраховують можливість випадкового збігу зображень. При дуже маленькою ймовірність випадкового збігу нею нехтують і вважають, що порівнювані об'єкти ідентичні, а отже, встановлена ??особа людини, від якого стався раніше невідомий об'єкт X.
Метод дозволяє порівнювати між собою результати дослідження незмінних молекул ДНК з ядер клітин крові, сперми і будь-яких інших тканин тіла людини. Картинка розташування ГВ-фрагментів, як було зазначено раніше, не змінюється протягом усього життя людини, вона індивідуальна. Тобто було доведено, що ймовірність того, щоб дві людини мали однакове число міні-сателітів, ідентичне розподіл їх довжин і абсолютно однакову їх послідовність в молекулі, дорівнює нулю. Повний збіг ДНК-візерунків спостерігається тільки у однояйцевих близнят. У родичів виявляється подібність генотипических візерунків, що дозволяє встановлювати спорідненість.
генотипоскопічна дослідження - це відносно нова область. Вона швидко з'явилася, і в ній настільки ж швидко з'являються великі технологічні та технічні зміни.
Останнім часом розроблений і активно впроваджується в експертну практику метод, що дозволяє проводити дослідження дуже малих кількостей зруйнованих молекул ДНК. Метод заснований на тому, що перед дослідженням ГВ-ділянок наявні фрагменти ДНК багаторазово копіюються, тим самим нарощуються до необхідного обсягу матеріалу, що підлягає дослідженню. Цей процес контрольованого молекулярного копіювання ДНК отримав назву - метод ампліфікації, заснований на ланцюгової реакції полімеризації (ПЛР).
Необхідно пам'ятати, що біологічні тканини, що знаходяться поза організмом, схильні до змін, а ДНК - деградація внаслідок гнильних процесів, сильно схильна руйнівному впливу ферментів, чутлива до факторів зовнішнього середовища, наявності бактерій і забруднення чужорідної ДНК.
Тому питання правильного зберігання біологічних об'єктів має для генотіпоскопіческой експертизи дуже важливий. Такі об'єкти підлягають консервації у вигляді сухих плям і зберіганню при кімнатній температурі. Ще краще помістити їх хоча б у звичайний морозильник, що забезпечують температуру до 10 о. Тут біологічні об'єкти можуть зберігається досить тривалий час.
За допомогою мікросателітов є можливість типировать невеликі ділянки деградованої ДНК. Якщо біологічний об'єкт пролежав кілька місяців (років) в сухих умовах і там збереглося хоча б фрагменти ДНК, то можливо за допомогою мікросателітов впізнати господаря сліду. З впровадженням в практику цієї модифікації генотипоскопии було усунуто одну з найбільш істотних перешкод на шляху практичного судово-медичного та криміналістичного використання методу, що полягає в обмеженні матеріалу, необхідного для проведення результативного дослідження, за обсягом та якістю.
У практиці є випадки, коли для дослідження видаються поодинокі кісткові уламки, виявлені після вибухів, пожеж або після ексгумації. При направленні на дослідження кісткової тканини слід пам'ятати, що кістка є особливою формою сполучної тканини, що складається з клітин і відсталого речовини, що містить около70% неорганічних сполук.
Органічні кислоти, які утворюють з кальцієм комплекси вигляді матриць, забезпечують довгостроковий захист ДНК від руйнівного впливу зовнішнього середовища. Нерідко для експертного дослідження представляються обгорілі, сильно деформовані або гнилостно змінені кісткові останки. Через процесів природного розпаду і руйнівного впливу різних факторів виділення деградованої ДНК може бути вельми проблематичним. У зв'язку, з чим при роботі з відсталої тканиною використовується метод органічної екстракції ДНК з п...
