ння інтенсивності світла, відбитого від зразка (I), до інтенсивності світла, відбитого від фону, або зворотну логарифмічну величину цього відношення (АR).
В якості фону використовують поверхню з високою величиною R: пластини із золота, перфторовані насичених полімерів, керамічні пластини і інші відповідні матеріали. Спосіб використовується для аналізу твердих зразків із застосуванням інтегруючої сфери або оптоволоконних датчиків, що працюють в режимі відображення. В останньому випадку, для відтворюваності одержуваних результатів, необхідно забезпечити стабільність умов проведення вимірювань, зокрема відносну нерухомість датчика, ступінь натиснення та інші умови. Спосіб пропускання-відображення. Даний спосіб є комбінацією пропускання і віддзеркалення завдяки спеціальній конструкції кювет і датчиків, в яких випромінювання двічі проходить через зразок, що дозволяє аналізувати зразки з низькою поглинає й розсіює здатністю.
В якості фону використовують спектр повітря або середовища порівняння.
Спосіб застосовний для рідких, в тому числі негомогенних проб.
Для реєстрації спектра досліджуваний зразок поміщають в кювету з дзеркалом або іншим дифузним відбивачем. Можливе використання оптоволоконного датчика, який занурюють в зразок.
Фактори, що впливають на результати вимірювань.
Температура зразка. Температура зразка може впливати як на його пропускання, так і на його відображення. Контроль температури важливий при аналізі термічно лабільних об'єктів, у разі яких різниця в кілька градусів може призводити до суттєвих спектральним змінам: тверді зразки, що містять воду, дисперсні системи, аморфні об'єкти та інше.
Волога і залишкові кількості розчинників. Наявність води і залишкових кількостей розчинників може вплинути на характер спектру і результати аналізу. Необхідність та умови висушування повинні бути зазначені в приватних фармакопейних статтях.
Товщина зразка визначає ступінь пропускання. Зі збільшенням товщини шару спостерігається збільшення поглинання. Тому при порівняльних вимірах пропускання товщина зразка повинна бути однаковою або враховуватися. При вимірюванні відображення товщина шару не має принципового значення, але потрібно враховувати, що товщина шару повинна бути порівнянною з глибиною проникнення променя в зразок. У разі недостатньої товщини, за зразком ставиться додатковий рефлектирующий матеріал, наприклад штамп із золотим покриттям.
Оптичні властивості зразка. При аналізі твердих зразків необхідно забезпечувати максимально можливу однорідність проби, тому що розходження в щільності або розмірах часток позначаються характері спектра. Спектри фізично, хімічно або оптично гетерогенних зразків слід реєструвати або зі збільшеним розміром пучка світла, або використовуючи пристрої, обертаючі зразки під час вимірювань. При цьому бажано проводити вимірювання кожного зразка кілька разів з наступним усередненням спектрів.
Поліморфізм. Різниця в кристалічній структурі (поліморфізм) впливають на спектр, що дозволяє відрізняти один від одного кристалічні або аморфні форми на підставі їх БИК-спектра. При проведенні аналізу необхідно враховувати, еталонний спектр, який кристалічної структури (модифікації) використовується в методі аналізу.
Вік зразків. Властивості зразків можуть змінюватися в часі, і ці зміни можуть обумовлювати спектральні відмінності для одних і тих же зразків. Дані зміни повинні бути враховані при побудові калібрувальних моделей, як для цілей ідентифікації, так і для цілей кількісного аналізу.
Ідентифікація.
Ідентифікація в БИК-спектрометрії заснована на принципі ідентичності спектрів одного і того ж речовини. Для проведення ідентифікації спочатку створюють бібліотеку еталонних спектрів (далі по тексту бібліотека ), підбирають оптимальну математичну модель для обробки спектрів та реалізації алгоритмів їх порівняння, тобто створюють метод ідентифікації. Далі проводять валідацію бібліотеки в сукупності з обраної математичною моделлю (див. Розділ Валідація методу ідентифікації ). Ідентифікацію проводять шляхом порівняння спектра випробуваного зразка зі спектрами в бібліотеці (див. Розділ Аналіз даних ). Створення бібліотеки спектрів. Бібліотека містить сукупності спектрів, несучі характеристическую інформацію про кожен об'єкт аналізу. Для кожної сукупності спектрів за допомогою відповідних методів і алгоритмів визначають оптимальні параметри ідентифікації. Дані установки дійсні для всієї бібліотеки. Для близьких об'єктів, нерозпізнаних при заданих установках, створюються підбібліотеки, в яких можуть бути використані інші методи попередньої обробки спектрів і алгоритми аналізу. Кількість спектрів в бібліотеці не обмежується, але при...
