дників, продукції еритропоетину і тривалості життя еритроцитів [Копилов, Щекочихін , 2011].
Відкриття гепсідіна (hepcidin) - железорегулірующего острофазового білка - дозволило багато в чому прояснити зв'язок між імунним механізмом порушення гомеостазу заліза і розвитком анемії хронічних захворювань: саме через посилення синтезу в печінці гепсідіна під впливом запальних стимулів відбуваються зниження всмоктування заліза в кишечнику і блокування вивільнення заліза з макрофагів.
У цих випадках спектр біохімічних досліджень буде включати і функціональні характеристики відповідних систем організму. При підозрі на патологію нирок - необхідно дослідження сироватки крові на сечовину і креатинін.
2. Матеріал і методи досліджень
. 1 Характеристика матеріалу дослідження
Планується дослідження пацієнтів в умовах лабораторії міської поліклініки, планується визначення показників, що характеризують різні анемічні стани.
Для аналізу буде використовуватися периферична кров людини, яку беруть шляхом проколу пальця стерильним ланцетом. Кров з поверхні пальця набирається індивідуальним стерильним капіляром Панченкова. Під загальним аналізом крові мається на увазі сукупність тестів з визначення кількості еритроцитів і лейкоцитів, а також характеристика еритроцитів і їх розподілу відповідно до розміру. Додатково досліджуються кількість тромбоцитів і ретикулоцитів.
У діагностиці анемій дослідження мазка периферичної крові має вирішальне значення. Особливо, якщо вдається виявити специфічні порушення морфології еритроцитів, а також зміни структури і кількості лейкоцитів і тромбоцитів. Дослідження мазка периферичної крові нерідко дозволяє встановити остаточний діагноз або значно звузити вибір з можливих нозологічних форм, для розмежування яких треба використовувати додаткові дослідження. Для цього на предметному склі готується тонкий мазок крові, в якому, після відповідної забарвлення, здійснюється підрахунок лейкоцитарної формули.
Для дослідження біохімічних параметрів необхідна кров, взята допомогою венепункції (зазвичай ліктьової вени).
При проведенні дослідження особливі вимоги пред'являються до техніки взяття крові, оскільки неминуче при цьому руйнування еритроцитів і збільшення вмісту в сироватці вільного гемоглобіну може зробити істотний вплив на результати.
2.2 Методи досліджень
. 2.1 Визначення ШОЕ
Обробка крові починається з розведення для визначення ШОЕ, так як для цього дослідження потрібна невелика кількість крові. Вимірюється швидкість осідання клітин крові в каліброваному капілярі протягом години.
Для визначення ШОЕ в капіляр, промитий в реактиве (п'ятивідсотковий розчин трехзамещенний цитрату натрію), набирається кров до мітки 0 (100 поділок) і видувається в пробірку з розчином цитрату натрію (співвідношення крові і реактиву 4: 1).
При підвищенні рівнів фібриногену і глобулінів сироватки крові сприяє з'єднанню еритроцитів у вигляді монетних стовпчиків і їх швидкому осадженню.
. 2.2 Підрахунок числа еритроцитів
Кількісно анемія виражається зниженням числа еритроцитів в одиниці об'єму.
Для підрахунку еритроцитів кров об'ємом 20 мкл видувається на дно пробірки з 4 мл ізотонічного розчину (0,9 відсотковий розчин NaCl), і піпетка кілька разів промивається у верхньому шарі рідини (розведення 1: 200). Еритроцити підраховуються уніфікованим методом під мікроскопом в камері Горяєва. Трактування зниженого кількості еритроцитів служать основою для диференціювання різних видів анемій.
. 2.3 Визначення рівня гемоглобіну
Уніфікована гемоглобін-ціанідна методика визначення гемоглобіну заснована на окисленні Hb в метгемоглобін залізосиньородистим калієм. Інтенсивність забарвлення пропорційна змісту Hb.
Хід визначення: в пробірку до 5 мл трансформуючого розчину (ацетон-ціангідрін - 0,5 мг, калій залізосиньородистим - 0,2 г, натрію гідрокарбонат - 1 г, дистильована вода - до 1 л) додається 20 мкл крові (розведення 1: 251); вміст пробірки ретельно перемішується і залишається стояти на 10 хв.
Ступінь зниження концентрації гемоглобіну - залізовмісного пігменту еритроцитів, додає крові червоний колір, характеризує вираженість анемії.
. 2.4 Визначення колірного показника
Середній вміст гемоглобіну в еритроциті позначається величиною МСН, яка розраховується за формулою:
МСН=[Нв]: еритроцити,
де МСН - середній вміст ге...
