в ПЕГ. Як і слід було очікувати, для частинок в розчині з молекулярними масами від 1 до 20 кДа індікатрісси светорассеянія практично не відрізнялися від констант (через співвідношення довжини хвилі світла (4300 А) і розміру молекул ПЕГ (20-100 А)). Оскільки відомо, що, де С, М - концентрація і середня молекулярна маса розсіюють частинок, відповідно, то це дозволяє визначати необхідні коефіцієнти розведення [15]. На рис. 5 наведені графічні залежності експериментальних інтенсивностей світлорозсіювання в нульовий кут (I (0)) до і після приведення їх до однієї концентрації. br/>В
Рис. 4. Графік Гинье для стандартного зразка (Daw Latex, Sigma, полістеріна, діаметр частинок 2R = 0,234 мкм). . br/>В
Рис. 5. Залежність інтенсивностей світлорозсіювання в нульовому вугіллі (I (0)) для різних ПЕГ у вихідному (чорні точки) і наведеному стані концентрацій (світлі кружечки). br/>
(крім ПЕГ-20000, у якого гранична концентрація розведення виявилася істотно нижче, ніж у інших ПЕГ). Таким чином, всі концентрації використовуваних ПЕГ були приведені до концентрації 250 мг/мл, що відповідає приблизно 25% об'ємної і ваговій концентрації. br/>
Таблиця 1. Результати титрування об'єднаної сироватки ПЕГ-6000. Обсяг вихідного буфера V = 750 мкл (метод світлорозсіювання)
Кут светорассея-ня 2 ?, градОб'еми компонентів сумішей, мклСивороткаПЕГ-6000 +100 +5 +10 +15 +20 +25 +30 +35 +40 +45 Інтенсивності світлорозсіювання, значення параметровI (0), имп/с128121933623837294663352340619492676357773792106617Rg, А863101110991168122112571293130312881285
В
Рис. 6. Графіки Гинье для об'єднаної сироватки, титруемой ПЕГ-6000 (метод світлорозсіювання). Нижні графіки відповідають меншим концентраціям ПЕГ-6000, а верхні - великим, відповідно
В
Рис. 7. Значення інтенсивностей світлорозсіювання (I (0)) від комплексів В«ПЕГ-білкиВ», що утворюються в об'єднаній сироватці крові при взаємодії сироваткових білків з різними ПЕГ
В
Рис. 8. Середні значення радіусів інерції (Rg) комплексів В«ПЕГ-білкиВ», що утворюються в об'єднаній сироватці крові при взаємодії сироваткових білків з ПЕГ-4000, ПЕГ-6000 і ПЕГ-8000
В
Рис. 9. Значення параметра 1014 * I (0)/Rg6, пропорційного середньому фізичній титру комплексів В«ПЕГ-білкиВ», що утворюються в об'єднаній сироватці крові при взаємодії сироваткових білків з ПЕГ різної молекулярної маси
На рис. 7-8 наведено зведені графіки зміни середніх значень параметрів I (0) і Rg час титрування об'єднаної сироватки (розведення в буфері 1:16) різними ПЕГ. p> Для отримання додаткової інформації про молекулярні механізми взаємодії ПЕГ з сироватковими білками на рис. 9 наведено графіки розрахованих значень параметра 1014 * I (0)/Rg6, пропорційного середньому значенню фізичного титру комплексів В«ПЕГ-білкиВ» в сумішах сироватки крові з ПЕГ. br/>
...
