нсивності розсіяння від кута) для стандартного зразка (Daw Latex, Sigma, полістеріна, діаметр частинок 2R = 0,234 мкм). Відомо, що радіус інерції (Rg) і радіус (R) для однорідної сфери пов'язані, як [14]. p> Для всіх отриманих в роботі експериментальних даних був проведений математичний і статистичний аналіз. Статистичну обробку результатів проводили методом варіаційної статистики із застосуванням t-критерію Стьюдента для середніх арифметичних (результати вважали достовірними при Р <0,05). br/>
2.3 Титрування сироваток крові поліетиленгліколь
Для титрування та аналізу модифікованих ЛП методом Мурра попередньо в сироватки і плазми крові додавали розчини ПЕГ до необхідної концентрації, після чого ці суміші інкубували при 8 В° С протягом 18 год [1, 2]. Опади відокремлювали центрифугуванням (центрифуга Т-51, Німеччина) при 6000 об/хв протягом 30 хв. Для розчинення обложених імунних комплексів до осаду додавали фізіологічний розчин (pH 7,4) в обсязі вихідної сироватки [3]. Остаточну дисоціацію імунних комплексів, що включають і модифіковані ЛП, проводили шляхом додавання сухого NaNO3, використовуваного як контрастера. p> При титруванні сироваток крові ПЕГ методом світлорозсіювання пластмасову або скляну циліндричну кювету заповнювали буферної сумішшю (фізіологічний розчин, 750 мкл, pH 7,4). Далі додавали 100 мкл сироватки і ретельно перемішували, після чого виробляли титрування розчинами ПЕГ по 5 або 10 мкл аж до досягнення запланованих кінцевих концентрацій. При кожній концентрації ПЕГ виробляли вимір інтенсивностей розсіяного світла (по чотирьох точках кутів розсіювання). З отриманих даних з використанням спеціальної програми обчислювалися середні значення радіусів інерції (Rg) утворених комплексів В«ПЕГ - білкиВ», а також значення інтенсивностей світлорозсіювання в нульовому вугіллі (I (0)) [14, 15]. br/>
3. Результати
.1 Експериментальні дані по светорассеянія
На рис. 4 наведена індікатрісса світлорозсіювання від стандартного зразка в координатах Гинье (ln I (h), h 2 ). Видно, що точки індікатрісси розсіювання добре відповідають лінійному графіку і високої монодисперсні частинок латексу. Значення радіуса інерції (Rg = 912 В± 15 А), обчислене з нахилу цього графіка виявилося близько до очікуваного (Rg = 906 А) для даного стандартного зразка (частки стандартизованого латексу - однорідні сфери).
Для вивчення особливостей взаємодії різних ПЕГ з білками сироваток крові нами були обрані ПЕГ з молекулярними масами від 1000 до 20000 Так. Були приготовлені розчини ПЕГ в фізіологічному розчині з максимальними концентраціями (з урахуванням їх розчинності). Для зручності експериментів необхідно було привести всі ПЕГ до однієї об'ємної концентрації. Для цього вимірювали індікатрісси світлорозсіювання від кожного з приготованих вихідних розчині...
