улька 70% розчином етилового спирту. p align="justify">. Протерти місце проколу 4-го пальця лівої руки змоченою ватним кулькою (повністю фалангу з зовнішньої і внутрішньої сторони). p align="justify">. Викинути використану кулька в ємність з дезрозчином для використаного матеріалу. p align="justify">. Відкрити стерильний скарифікатор одноразового використання. p align="justify">. Зробити прокол і викинути скарифікатор в ємність з дезрозчином. p align="justify">. Взяти стерильним пінцетом стерильну ватну кульку. p align="justify">. Першу краплю крові витерти і ватяну кульку викинути до ємності з дезрозчином. p align="justify">. Стиснути палець пацієнта зробити забір крові стерильним капіляром, самопливом в пробірку, або на предметне скло (В«падаюча крапляВ»). p align="justify">. Витягти стерильним пінцетом стерильну ватну кульку. p align="justify">. Прикласти ватяну кульку, змочену 70% розчином етилового спирту до місця проколу. p align="justify">. Викинути використану ватяну кульку в ємність з дезрозчином. br/>
Приготування мазка
В
Першу краплю крові видаляють ваткою, а з другої краплі виготовляється мазок. Кров необхідно використовувати якомога швидше, поки вона не зазнала змін і не втратила своїх фізичних властивостей. Бистронаступающее згортання крові робить приготування мазка абсолютно неможливим. p align="justify"> Мазок не повинен доходити ні до кінця, ні до країв предметного скла. Тому крапля крові повинна бути діаметром не більше 2-3 мм. Предметне шліфоване скло, яким робиться мазок, має бути вже скла, на яке наносять мазок. Для цього кути шліфованого скла обламують пінцетом. З метою приготування мазка шліфоване скло ставлять перед краплею крові під кутом 45 В° і просувають уперед до зіткнення з нею. Коли кров рівномірно розподілиться між обома стеклами, швидким рухом роблять мазок. br/>
Практична робота № 2
Приготуйте фарбу і пофарбуйте метиленовим синім, азуром I і II, діамантовим крезіловим синім ретикулоцити.
Забарвлення ретикулоцитів в пробірці
Метод 1 - забарвлення ретикулоцитів в пробірці діамантовим крезіловим синім.
Перед вживанням готують в пробірці робочий розчин діамантового крезілового синього з розрахунку на краплю 1% розчину оксалату калію 4 краплі розчину фарби діамантового крезілового синього. У фарбу додають 0,04 мл крові (дві піпетки до позначки 0,02). Суміш ретельно, але обережно перемішують і залишають на 30 хвилин. Потім знову перемішують і готують тонкі мазки. p align="justify"> Метод 2 - забарвлення ретикулоцитів в пробірці азуром II.
У пробірку поміщають 0,05 мл розчину фарби АЗУР II і 0,2 мл крові. Суміш ретельно перемішують і залишають на 20 - 30 хвилин. Знову перемішують і готують тонкі мазки. p align="justify"> Метод 3 - забарвлення ретикулоцитів в пробірці азуром I.
У пробірку поміщають 0,3 - 0,5 мл розчину фарби АЗУР I та 5 - 6 крапель крові піпеткою від апарату Панченкова. Пробірку закривають гумовою пробкою, суміш ретельно, але обережно перемішують і залишають на 1 - 1,5 години (ретикулоцити забарвлюються краще при експозиції 1,5 - 3 години). Перемішують і готують тонкі мазки. p align="justify"> В даний час у продажу є готові барвники для ретикулоцитів заводського виготовлення. Забарвлення ретикулоцитів з їх допомогою проводиться згідно інструкції, що додається. p align="justify"> Забарвлення ретикулоцитів на склі
Метод 1 - забарвлення метиленовим синім.
Для дослідження ретикулоцитів користуються і водним розчином метиленової синьки 1:500.
На чисте, знежирене покривне скло наносять краплю розчину метиленової синьки, кладуть його на висушений нефіксованої препарат крові та одразу розглядають іммерсіей мікроскопа.
Практична робота № 3
Проведіть підрахунок ретикулоцитів і розшифруйте результат
Ретикулоцити в мазку крові
В
В
Молоді ретикулоцити містять невелику кількість гемоглобіну і при забарвленні звичайними гематологічними методами (наприклад, за Романовським-Гімзою) забарвлюються як кислими, так і основними барвниками і виглядають в мазку як поліхроматофільние еритроцити <# "79" src = "doc_zip18.jpg "/>
де: RET% - вміст ретикулоцитів у%, А - кількість ретикулоцитів, виражене в ‰, B - кількість підрахованих еритроцитів (1000).
У здорових людей число ретикулоцитів в крові становить 2-12 ‰, або 0,2-1,2%
В
Метод 2
Для полегшення підрахунку ретикулоцитів американські дослідники пропонують використовувати калібрувальний диск Міллера. Пристрій розміщується в одному окулярі мікроскопа. p> Диск Міллера являє собою два квадрата; одна сторона малого квадрата (В) становить 1/9 сторони в...
