гічних аналізаторах кількість еритроцитів, лейкоцитів, гемоглобіну, гематокриту, MCV і MCH визначаються автоматично.
. 2.10 Визначення метаболізму заліза
Діагноз ЗДА попередньо встановлюють при зниженому рівні гемоглобіну і низькому колірному показнику, на тлі типових для залізодефіцитних симптомів (слабкість, запаморочення, підвищена стомлюваність, трофічні порушення).
Але найважливішим показником ЗДА є зниження рівня заліза сироватки (норма - 13-28 ммоль/л для чоловіків; 11-26 ммоль/л для жінок), зниження концентрації феритину, а також підвищенні рівня загальної залізозв'язувальної здатності сироватки. ОЖСС - біохімічний лабораторний показник, що характеризує загальна кількість заліза, яке може зв'язатися з наявним в плазмі трансферрином. Побічно відображає кількість трансферину в плазмі. Нормальні значення загальної залізозв'язувальної здатності сироватки - 40,6-62,5 мкмоль/л.
Норма феритину в крові для дорослих чоловіків - 20-250 мкг/л. Для жінок норма аналізу крові на феритин - 10-120 мкг/л.
Інформативним показником оцінки ме?? аболізма заліза є коефіцієнт насичення трансферину залізом, який розраховується за формулою:
Насичення трансферину залізом (%)=Залізо (мкг/дл): [Трансферин (мг/дл) х 1,41] х 100%
При залізодефіцитної анемії цей показник знижується (менше 15 відсотків), а при перевантаженні залізом значно підвищується (більше 50 відсотків).
Переважно для аналізу використовувати ранковий зразок крові, оскільки рівень заліза в крові коливається протягом доби. Пункція вени повинна бути проведена з мінімальним застоєм крові, кров повинна вільно надходити в пробірку. Кров для визначення заліза необхідно збирати в герметично закриті пробірки.
З численних методів кількісної оцінки вмісту заліза в сироватці крові найбільшого поширення набули методи визначення заліза по кольоровій реакції з батофенантроліном. В основі цих методів лежить властивість двовалентного відновленого заліза (Fe 2+) утворювати яркоокрашенного комплекс з батофенантроліном. Інтенсивність забарвлення комплексу, відповідну концентрації Fe 2+ в сироватці, визначають фотометрически. Попередньо білки сироватки крові осаджують трихлороцтової кислотою і відновлюють сироваткове залізо в двовалентну його форму (Fe 3+ в Fe 2+) за допомогою гідразину або тиогликолевой кислоти.
2.2.11 Визначення рівня білірубіну
Більшість використовуваних біохімічних методів визначення білірубіну в крові засновані на реакції діазосочетанія [Лабораторна діагностика анемій, 2001; Клінічне керівництво ..., 2003]. У цій реакції диазотированного сульфаниловая кислота реагує з білірубіном з утворенням двох азопігменти - з червонувато-фіолетовим забарвленням при нейтральному pH, і синьою - при високих значеннях pH. Диазотируют метод забезпечує отримання відтворюваних і надійних результатів. У цій процедурі акселераторами служать водний розчин кофеїну і бензойнокислого натрію.
Білірубін в сироватці зазвичай визначають у вигляді загального і прямого білірубіну (Білірубін кон'югований, пов'язаний; Bilirubin direct).
Шляхом віднімання прямого із загальної кількості визначають концентрацію непрямого білірубіну (або некон'югованого, або вільного білірубіну).
При визначенні прямого білірубіну реагує з діазореактивом велика частина? - білірубіну та кон'югованого білірубіну і невелика частина некон'югованого білірубіну. Високе значення рН прискорює вступ в реакцію некон'югованого білірубіну при визначенні прямого білірубіну; реактив для прямого білірубіну повинен містити, принаймні, 50 ммоль/л HCI, щоб запобігти вступу в реакцію некон'югованого білірубіну.
Додавання в реакційне середовище сполук, що руйнують водневі зв'язки в молекулі білірубіну (кофеїну, метанолу, етанолу, сечовини або поверхнево активних сполук), необхідно для реакції некон'югованого білірубіну з диазотируют реактивом.
За допомогою реакції Ван-ден-Берга можна відрізнити прямий білірубін від непрямого. Якщо реакцію проводять у водному середовищі, з діазореактивом Ерліха з'єднується тільки розчинний прямий білірубін (позитивна пряма реакція). При обробці метанолом відбувається розрив водневих зв'язків в молекулі непрямого білірубіну, і в реакцію вступають як прямий, так і непрямий білірубін, що дозволяє визначити їх сумарну концентрацію, тобто загальний білірубін. Рівень непрямого білірубіну визначають так само, як різниця між концентраціями загального і прямого білірубіну. Проте результати дослідження залежать від часу, протягом якого ставиться пряма реакція. Якщо воно перевищує одну хвилину, невелика частина непрямого білірубіну зв'язується з ре...
