а на желточно-сольовому агарі колонії стафілококів можуть утворювати В«райдужний віночокВ», що є однією з ознак їх патогенності.
З підозрілих колоній готують препарати, які забарвлюють за Грамом. При наявності стафілококів в препараті виявляється грампозитивні дрібні коки, що розташовуються неправильними гронами.
Для підтвердження ознак патогенності стафілококів ставлять реакцію плазмокоагуляціі. У прилад з 0,5 см 3 цитратной плазми крові кролика, розведеною фізіологічним розчином у співвідношенні 1:4, вносять петлю чистої добової культури стафілокока і ставлять у термостат при температурі 37 В° С. Реакцію плазмокоагуляціі враховують через 3 - 4 години (не струшуючи пробірку) і залишають у термостаті на добу для остаточного обліку через 24 ч.
Для постановки реакції плазмокоагуляціі можна використовувати також суху цитратную плазму крові кролика.
Реакцію вважають позитивною, якщо плазма коагулюється на згусток.
Обробка результатів
Для визначення кількості стафілококів враховують колонії стафілококів, що дали позитивну реакцію плазмокоагуляціі. p> При розрахунку на 1 г продукту кількість підрахованих колоній множать на ступінь розведення і ділять на кількість посівного матеріалу.
Визначення сульфітвосстанавлівающіх клостридій
Сутність методу полягає у специфічному зростанні сульфатвосстанавлівающій клостридій в середовищах СЦС, Вільсон-Блера, ЖСС-1 і ЖСС-2, на яких в результаті відновлення серністокіслого натрію в сірчанокислий натрій відбувається взаємодія з хлористим залізом і утворюється почорніння середовища за рахунок сірчистого заліза.
Проведення аналізу на середовищі Вільсон-Блера
У пробірки, що містять по 9 см 3 розплавленої та охолодженої до температури 45 В° С середовища Вільсон-Блера (або РСЛ), вносять стерильною піпеткою по 1 см 3 десятикратних розведень (від 10 -1 до 10 -7 ) суспензії випробуваного продукту. Посівний матеріал і середу ретельно перемішують. p> Посіви поміщають у термостат з температурою 46 В° С на 8-12 годин 37 В° С на 20 годин. Поява в середовищі чорних колоній або почорніння всього середовища вказує на присутність сульфітвосстанавлівающіх клостридій.
Почорніння середовища Вільсон-Блера можуть викликати багато ентеробактерії. Для підтвердження зростання сульфатвосстанавлівающіх клостридій використовують пересівши в пробірки зі середовищем Кітта-Тароцці, попередньо прогрітій протягом 25 хвилин у киплячій водяній бані і швидко охолодженої до 45 В° С. Термостатування посівів проводять при (37 В± 0,5) В° С, щодня протягом 5 діб, перевіряючи в них помутніння середовища, виділення газу, поява стороннього запаху, іноді розкладання шматочків печінки. Відразу після появи ознак росту готують мікроскопічний препарат. Матеріал для цього беруть пастерівської піпеткою з дна пробірки. При мікрокопіювання відзначають грампозитивні палички, що утворюють овальні спори. p> У спороутворюючих грампозитивних мікроорганізмів виявляють каталазну активність за допомогою розчину перекису водню 30 г/дм 3 . Відсутність бульбашок газу при додаванні до краплі культуральної рідини такої ж кількості перекису водню дозволяє вважати, що в посівах присутні мікроорганізми з роду клостридій.
У разі відсутності спір у мікроскопічному препараті позитивної проби на каталазу, присутності в посівах змішаної мікрофлори, 1-2 краплі накопичувальної середовища переносять у стерильну чашку Петрі, заливають розплавленої та охолодженої до 45 В° С середовищем Вільсон-Блера. Застиглу поверхню щільного середовища заливають холодним агаром. Посіви інкубують 24 - 48 год при (37 В± 0,5) В° С. Поява в нижньому шарі агару чорних або коричневих колоній свідчить про присутність у посівах сульфітвосстанавлівающіх клостридій.
Обробка результатів
За позитивний титр клостридій (сульфітвосстановітелей) приймають те максимальне розведення суспензій, в посіві якого відбулося почорніння середовища. Наприклад, якщо характерні зміни спостерігаються в пробірках з розведенням 10 -1 , то вважають, що в досліджуваному продукті буде 10 (Або 1 * 10 1 ) клітин в 1 г; якщо характерні зміни спостерігаються в пробірках з розведенням 10 -2 , то вважають, що в досліджуваному продукті - 100 (або 1 * 10 2 ) мікробних клітин в 1 р.
13. Оцінка санітарно-технічного стану території
Територія огороджена парканом. При в'їзді та виїзді з території м'ясопереробного підприємства для дезінфекції коліс автотранспорту обладнані спеціальні кювети, постійно заповнені дезінфекційним розчином. Для попередження замерзання розчину в зимовий період використовують обігріваючу систему (під дезінфекційним бар'єром прокладені труби центрального опалення). Щоб уникнути попадання атмосферних опадів і зниження концентрації...
