на гідрофобною поверхні (щодо концентрації клітин в пробі 300х103/мл і 400х103/мл) а також між рівнем активності ферменту на основі модифікованого методу і в тесті із застосуванням лу поліморфноядерних гранулоцитів (щодо концентрації клітин в пробі 100х103/мл і 400х103/мл (див. Додаток А, Б).
Рівень ферментативної активності Нф в розчині (модифікований метод) значно перевищує таку у відношенні клітин, іммобілізованих на гідрофобною поверхні, і меншою мірою щодо клітин у тест-системі, що використовує лизировать Нф. Різниця між показниками активності MPO (щодо середнього значення ферментативної активності в кожній експериментальній точці для всіх донорів в досліджуваній вибірці) між методом визначення даної активності в розчині на основі модифікованого методу і за допомогою твердофазного носія в експериментальних пробах, що містять 300х103 кл/мл - 24% , що містять 400х103 кл/мл - 23%.
Таким чином, модіцірованная нами лабораторна тест-система дозволяє спектрофотометрически визначати активність MPO, спонтанно ліберіруемой з азурофільних гранул в середу інкубації без порушення цілісності клітини; повністю виключає ймовірність видалення частини клітин до стадії активної взаємодії MPO c субстратной хромогенного сумішшю, значно збільшуючи тим самим концентрацію секрітіруемой з азурофільних гранул MPO, характеризує состветветственний підвищений рівень активності ферменту, вираженої в одиницях оптичної щільності, на етапі детекції результатів.
Активність MPO, виявлена ​​за допомогою твердофазного методу, включає стадію іммобілізації на планшеті і безпосередньо зівісіт від адгезивних властивостей Нф (тест-система передбачає видалення незв'язаних з твердофазним носієм клітин). І, в окремих випадках, недостатній вміст клітин на стадії тесту-аналізу, що характеризує взаємодії поліморфноядерних гранулоцитів з субстратом, може значно знизити показники ферментативної активності. p align="justify"> Пероксидазна активність Нф, виявлена ​​за допомогою лу клітин, індукованих дистилированной водою, також знижена в порівнянні з мофіцірованним методом. Різниця ферментативної активності між методами (щодо середнього значення активності ферменту в кожній експериментальній точці для всіх донорів в досліджуваній вибірці) щодо концентрації клітин, рівної 100х103/мл, 400х103/мл, становить 34% і 18% відповідно. p align="justify"> На цій підставі можна припустити, що така процентна різниця, може бути пов'язана з неповною реалізацією даної тест-системи (лізису поддверглісь не всі клітини, що знаходяться в дистильованою воді).
3.4 Порівняльна оцінка модифікованої лабораторної тест-системи визначення активності MPO Нф в розчині з В«Референтним методомВ»
Визначення діагностичної чутливості, діагностичний специфічності, прогностичної цінності позитивного результату, прогностичної цінності негативного результату (таблиця 3.4)
<...
